Culture de fibroblastes

[invite65575835]

Bonjour à tous,

je cultive des fibroblastes d'origine humaine à partir de biopsie de peau et rencontre des problèmes dans la prolifération de ceux-ci. en effet, j'observe une croissance beaucoup plus lente que d'habitude et des "trous" se forment dans le tapis cellulaire, comme si les cellules s'étiraient... (Cf photo jointe).
je ne comprend pas car j'utilise les mêmes lots de sérum et DMEM Glutamax depuis quelques mois et je n'ai pas eu de problèmes à ce jour...

est-ce déjà arriver à quelqu'un???

merci beaucoup
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[invite54839f53]

T'as des info sur les donneurs? Puisque un fibro d'un patient de 20 ans et d'un autre de 90 ans vont certainement réagir différemment en culture...Sinon desoler mais ca m'est jamais arriver j'ai toujour cru que les fibro etaient quasi increvables ( bon okay grosse exageration mais ca tien bien bien)...Si ta pas changer de lot de Serum ou de milieu ...reste ton incubateur (c'est rare, le truc bipe a t'en faire peter les oreille quand un truc cloche normalement et ca aurait buter tes cellules plus vite...)...C'est pas la congelation non plus t'aurais juste une mortalité plus élevé a la decongelation et apres ca repartirais (sauf exposition a des produits chelou^^)....Donc a par l'origine des cellules je vois pas...

[invite65575835]

oui il y a des fibro d'enfants et de personne plus âgées mais j'observe les mêmes "symptômes" pour les deux cultures... merci quand même j'ai fait un P1 sur un flask ya 5jrs et ça repart très très doucement... trop bizarre. et test myco négatif....