Bonjour,
Je travail sur les levure et je souhaite les transformer afin qu'elles expriment ma protéine d’intérêt couplée à une protéine fluorescente. Pour cela j'utilise la technique : PCR based transformation method qui consiste à utiliser un plasmide (pRS306) qui contient la protéine fluo et faire une PCR avec des oligonucléotides codants pour les séquences de mon gènes que je veux marquer. Je comprend la théorie mais techniquement je ne vois pas du tout comment cela se produit, comment mon plasmide intègre mes séquences codantes? Est ce que il faut digérer mon plasmide avant? si vous avez des publi ou des revues qui explique ca en détail je vous en serais très reconnaissant!
Merci beaucoup pour votre aide.
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