exercice activité enzymatique

[invite166f3b85]

Bonjour,
J’ai un exercice à faire en enzymologie sur le calcul de l’activité enzymatique, le voilà :
Afin de déterminer l’activité d’une enzyme spectrophotométriquement en suivant l’apparition du produit à 450 nm. Pour cela, un volume de la solution enzymatique et celui du substrat sont incubés. La réaction est conduite pendant 2 min et la différence d’absorbance est estimée de 0,86.
-Calculez, en UI/ml, l’activité de l’enzyme sachant que ε _{P 450nm} = 2100 M^-1 cm^-1.
L’obstacle c’est que UI s’exprime en µmol/min, l’unité demandée est UI/ml donc : µmol/min.ml. C’est facile de calculer la concentration du produit par la loi de Beer-Lambert et de la convertir en µmol/ml au lieu de mol/l (j’ai trouvé 0,41µmol.ml), mais cette activité doit être celle de l’enzyme en une minute pour avoir l’unité µmol/min.ml= UI/ml, selon les données de l’exercice la réaction a été mené pendant 2 min, on ne peut pas simplement diviser par 2 pour avoir l’activité en µmol/min.ml (car l’activité de l’enzyme en une minute n’est pas égale à la moitié de son activité en 2 min), et on ne peut pas écrire AE= 0,41 µmol/2min.ml, comment faire pour trouver l’activité en µmol/min.ml ?
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[invite2eb5a45f]

car l’activité de l’enzyme en une minute n’est pas égale à la moitié de son activité en 2 min

Si, lorsque le substrat est en excès (autrement dit quand la quantité du produit de la réaction croit linéairement avec le temps). Et c'est le cas ici je suppose.

Et effectivement, lorsque le substrat n'est plus en excès et que la réaction inverse n'est plus négligeable, on n'est plus dans le domaine linéaire.

[invite166f3b85]

Merci pour votre réponse, mais on ne sais pas si le substrat est en excès ou non, même si on le savait, on ne connait pas l’équation de la droite [Produit]= a(t)+b, du coup on ne peut pas calculer l'activité enzymatique en "une" minute

[invite2eb5a45f]

Une mesure d'activité enzymatique avec un seul point de mesure se fait forcément avec un substrat en excès.

On te donne une différence absorbance entre t0 et t2min, l'éventuel "+b" disparait.

[A voir en vidéo sur Futura]

[invite166f3b85]

et le "a" , c'est 1 ?

[invite2eb5a45f]

Mais non, "a" c'est ce que tu cherches, c'est l'activité enzymatique.

[invite166f3b85]

loool aaaah d'accord ... concentration du produit par unité de temps -_- ... donc la réponse sera la moitié de ce que j'ai trouvé, Merci beaucoup