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Technique ADN recombinant



  1. #1
    Omnitrix

    Technique ADN recombinant


    ------

    Bonjour,

    J'ai un peu de mal à saisir ce qui se passe à certaines étapes du clonage de l'ADN....
    Au niveau de la technique du "blue-white screening" :

    1)Ce que je ne comprend pas c'est que une fois que l'adn à été intégré dans le site de clonage sur le plasmide il fait en sorte que la beta-galactosidase n'est pas produite par lacz du moins pas une beta-galactosidase fonctionnelle.

    2) pour le puC19 qui contient un mcs (multiple cloning site) comment se fait-il que le mcs qui consiste donc en des séquences spécifique de nucléotides si j'ai bien compris ne perturbe pas la lacZ vu qu'il est en plein dans le gène si j'observe bien l'image suivante ( je joins l'image)

    Donc en gros pourquoi la séquence MCS ne perturbe pas la transcription de lacZ alors qu'il s'agit aussi d'une séquence de nucléotide étrangère au gène lac z

    Si quelqu'un pouvait m'éclaircir le sujet car c'est le flou totale sur cette partie du cours !!

    -----

  2. #2
    Omnitrix

    Re : Technique ADN recombinant

    L'image ..
    Images attachées Images attachées

  3. #3
    Flyingbike

    Re : Technique ADN recombinant

    Parce que le gène (lacZ avec MCS) a été designé de la sorte. Soit les mutations engendrées n'ont pas de conséquence fonctionnelle, soit les sites ont été choisis et placés sans modifier la séquence codante (par exemple en changeant de codon) (a mon avis un peu des deux).
    La vie trouve toujours un chemin

  4. #4
    Omnitrix

    Re : Technique ADN recombinant

    Ok merci beaucoup

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