extraction de gel

[inviteca62d3bb]

bonjour a tous

je dois faire une extraction d un plasmide qui a migre sur gel d agarose donc je dois faire une extraction sur gel est ce que auelau un peut il m expliquer le concept je dois utiliser le kit de biolabs de monarch
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[Loupsio]

La première chose a faire aurait été de lire e manuel d'utiisation (puisqu'ils t'y expliquent quoi faire et pourquoi),
Le concept est tres simple dans ton tube ou tu récolte ton plasmide il peut y avoir plusieurs longueur d'ADN (ton plasmide avec insert, mais pourquoi pas ton plasmide vide, ou autre...) ducoup tu dois séléctionner uniquement ce qui t'interesse, tu les sépare donc par electrophorèse sur gel, et ensuite puisque tu visualise ou se trouve ton ADN sur ton gel, il suffit d'extraire (physiquement, avec une lame de rasoir par exemple)le petit carré ou se trouve la bande d'ADN qui t'interesse, ensuite le gel va etre fondu et purifié afin de retirer l'agarose et ne récupérer que l'ADN

[inviteca62d3bb]

oui j ai lu le protocole du kit et tout mais se que je veux savoir c est l utilite de re extraire le plasmide sur gel comme on la extre et digere deja

[inviteca62d3bb]

question un peu bete apres la migration du gel est ce que on le met sur un rotateur avec du bromeur

[A voir en vidéo sur Futura]

[invite2f544a27]

Moi ce que j'ai fait en stage, le but st sans doute de récuprerer que l'insert pour le cloner dans un autre vecteur pour le fusionner a une protéine fluorescente par exemple
ce qui a été mon cas..