Clonage/ synthèse ARN/ ADN

[invited22670de]

Bonjour,
Je souhaiterais cloner (bien évidemment pas réellement) une séquence d'ADN d'une bactérie.
Je souhaiterais savoir quelle(s) est(sont) la(les) technique(s) la(les) plus simple(s) pour clone, personnellement, j'ai pensé à l'introduction de ce gène dans un plasmide puis dans une bactérie (ex: E. Coli), puis la laisser se multiplier de manière à copier le plasmide ; une autre à laquelle j'ai pensé, la technique PCR qui permet l'amplification d'une séquence d'ADN.
Ces techniques semblent-elles appropriées?

Aussi je souhaiterais synthétiser une séquence d'ARN complémentaire à un gène cible.
Comment permettre la transcription d'un gène?

J'espère que vous pourrez m'éclaircir
Pour information je suis en L1
En vous souhaitant une bonne journée
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[Flyingbike]

Je souhaiterais savoir quelle(s) est(sont) la(les) technique(s) la(les) plus simple(s) pour clone, personnellement, j'ai pensé à l'introduction de ce gène dans un plasmide puis dans une bactérie (ex: E. Coli), puis la laisser se multiplier de manière à copier le plasmide ; une autre à laquelle j'ai pensé, la technique PCR qui permet l'amplification d'une séquence d'ADN.
Ces techniques semblent-elles appropriées?

en gros oui, mais quel est le but, au final ?

Aussi je souhaiterais synthétiser une séquence d'ARN complémentaire à un gène cible.
Comment permettre la transcription d'un gène?

Il est possible de faire une transcription in vitro, mais encore une fois quel est le but ?

[invited22670de]

L'objectif est de synthétiser un ARN guide pour l'utiliser dans la technique CRISPR/Cas9, comprenant une séquence précise complémentaire à la séquence d'ADN cible (crRNA).
L'autre correspond à l'ADN à insérer après la "coupure" de la séquence d'ADN.