Western blot

[invite80c6daae]

Bonjour, je n'arrive pas à comprendre les manipulations qu'on a réaliser pour faire un certain westernblot :nd ce qui est écrit au dessus du western blot : c'est ce qu'on a ajouté
Mais je ne comprends pas ce qui est écrit à gauche Ha et GFP cela correspond au fait qu'on a injecté du GFP et du HA ou bien les anticorps correspondant ?
Et je ne comprends pas l'utilité d'une immunoprecipitation dans ce cas, de plus elle serait faites avec des anti GFP ?
De plus je ne suis pas sur de la traduction de HA tagged G protein et malgrés la légende j'ai des difficultés à comprendre le western ne maîtrisant pas vraiment l'anglais

Merci d'avance pour votre aide

doc d.png
legende d.jpg
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[invite80c6daae]

http:/**********/10.1038/ncb3487

Voici le lien de l'article le western se situe p7 et p6 il y a un peu de texte qui parle de la réaction

[Flyingbike]

Bonjour

Le lien donné étant illégal, je l'ai supprimé

[Flyingbike]

Je n'ai pas lu en détail

Mais j'imagine qu'on étudie l'interaction entre une protéine taguée HA et une autre avec un GFP. On immuniprécipite par la GFP (IP : GFP) et on regarde si on récupère en même temps la protéine HA (et GFP comme controle)

HA tagged G protein c'est une protéine G taguée HA, simplement

[A voir en vidéo sur Futura]

[invite80c6daae]

Je te remercie Flying j'ai compris !
J'ai également une autre question sur la PLA ( proximity ligation assay ) une méthode qui est dans l'article et que je ne connaissais pas, en regardant sur internet je crois qu'elle sert à voir si 2protéines sont proches , à l'image du fret ( je ne vois pas la différence...)
Je poste les documents sur la PLA PLA def.png
De même je n'arrive pas bien à interpreter le document B normalement les siSHank sont censé augmenté la Talin or sur la 1er image on voit qu'il n'y a pas de talin dans l'encadré même si après certes elle augmente.
Et enfin il y a un element qui m'échappe on nous dit dans l'article que l'intégrine est à la fois responsable de l'adhésion mais AUSSI de la vitesse/de l'invasion cellulaire, or si une cellule adhère comment peut elle continuer d'envahir ?

[invite80c6daae]

S'il vous plait éclairez moi