Bonjour,
Suite à une expérience en labo, j'ai réalisé une PCR sur gène de 1041 pb, en parallèle de la réaction PCR classique avec les deux amorces forward et reverse, j'ai réalisé, sous la demande de mon encadrant, deux contrôles : une réaction avec uniquement l'amorce reverse et une autre avec uniquement l'amorce forward.
Pour l'un des échantillons testé, on a une amplification aspécifique lorsque l'amorce reverse est présente seule et cette amplification aspécifique disparé lorsque le sdeux amorces sont présentes simultanément.
Sauf que je ne comprend pas tout, en quoi est dut l'amplification aspécifique en présence de l'amorce Reverse seule ? Et pourquoi cette aspécifité disparait lorsqu'on a nos deux amorces ?
Que peut-on faire pour diminuer cette aspécificité ?
Merci d'avance pour vos réponses
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