Intensité lumineuse taches CCM

[invitea88e6ae4]

Bonjour

Je suis en train d'établir un programme qui fait une analyse quantitative à partir d'une ccm.

Pour trouver les concentrations des substances de références dans les échantillons, j'utilise l'intensité lumineuse de ces taches.

Mais voila : quelle courbe me permettrait de déceler cela :

y = Iref / Iechantillon (rapport intensité tache référence sur intensité tache échantillon)

ou

y = log(Iref/Iechantillon) (absorbance de la tache d'échantillon par rapport à celle de référence)

??

Merci beaucoup

Thomas

PS : je pense que si j'utilise la courbe y = Iref / Iechantillon, il me suffirait de sélectionner le point le plus "haut" de cette courbe, cela nous donnerait un nombre auquel il faudrait multiplier la concentration de la solution de référence pour obtenir la concentration de la solution d'éachnatilon. Qu'en pensez vous ?
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[invitea88e6ae4]

en fait je voudrais obtenir un graphe de ce genre (les différents courbes représentent les courbes des 12 taches à la meme hauteur des 12 échantillons de la CCM)



Que pensez vous ce que représentent les AU ici ? La luminosité ? l'absorbance ? la transmittance ?

Merci

[invite882b13dc]

Salut,

Les courbes d'étalonnage en CCM cont rarement linéaire. Apparemment tu as Wincats, donc tu as accès aux modèles de regression que ce logiciel utilise et qui colle pas mal pour ce que j'ai pu en voir (du genre Michaelis, me semble-t-il..., ça doit se trouver comme formule! ).

Je ne sais pas trop comment tu peux le faire de façon "artisanale", mais le scanner de Camag compare l'intensité renvoyée par la tache à l'intensité initiale. Donc tes AU c'est plutôt une absorbance.

PS: je t'avais transmis dans ton précédent fil notre mode d'emploi de Wincats... l'as tu vu?

[invitea88e6ae4]

non je n'ai pas vu le mode d'emploi peux tu me redonner l'adresse sTP ?

le pb c'est que si l'intensité lumineuse de lé référence est in férieur à l'échantillon alors le logarithme décimale est négatif ! don on se retoruve avec une courbe dans les deux sens !

[A voir en vidéo sur Futura]

[invitea88e6ae4]

en fait je voudrais savoir quelles propriétés sur les taches sont utilisées par wincats : luminosité des taches ? absorbances par rapport à la référence ?

[invite882b13dc]

peux tu me redonner l'adresse sTP ?

dans ton précédent fil

en fait je voudrais savoir quelles propriétés sur les taches sont utilisées par wincats : luminosité des taches ? absorbances par rapport à la référence ?

le scanner de Camag compare l'intensité renvoyée par la tache à l'intensité initiale. Donc tes AU c'est plutôt une absorbance.

Pour en savoir plus, il faut contacter CAMAG. Ils appellent ça de la densitométrie, parceque le faisceau analysé est réfléchi et non transmis comme dans une cuve de spectro