Problème de répétabilité des pics en HPLC

[lolo38]

Bonjour,

j'ai un problème de répétabilité de l'aire de mes pics sur une HPLC waters.
J'injecte toujours une solution à la meme concentration mais je n'arrive pas à avoir la meme aire d'une injection à l'autre.(aire du premier pic à 1800 ua puis le second à 1000 ua...)
Mon éluant est un mélange d'eau et d'acétonitrile (20:80).
Les conditions du DEDL sont :
Nébulisateur à 40°C, évaporateur à 40°C et débit de gaz à 1.6L/min
J'utilise une colonne greffée NH2 qui vient d'étre livrée mais que j'ai conditionné, j'ai une boucle de 20µL donc aucun problème dans le volume d'injection.
J'ai essayé de changer de vanne réhodyne mais aucun changement.
Aucune fuite n'est visible.
J'utilise un DEDL de chez perkin elmer que j'ai nettoyé (nébulisateur à 120°C évaporateur à 80°C et débit de gaz à 2.8L/min).

Voilà donc je ne sais plus trop comment faire pour régler ce problème!

Si quelqu'un a une idée à me proposer...

Merci d'avance à tous!

lolo38
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[tétrodotoxine]

Bonjour,

j'ai un problème de répétabilité de l'aire de mes pics sur une HPLC waters.
J'injecte toujours une solution à la meme concentration mais je n'arrive pas à avoir la meme aire d'une injection à l'autre.(aire du premier pic à 1800 ua puis le second à 1000 ua...)
Mon éluant est un mélange d'eau et d'acétonitrile (20:80).
Les conditions du DEDL sont :
Nébulisateur à 40°C, évaporateur à 40°C et débit de gaz à 1.6L/min
J'utilise une colonne greffée NH2 qui vient d'étre livrée mais que j'ai conditionné, j'ai une boucle de 20µL donc aucun problème dans le volume d'injection.
J'ai essayé de changer de vanne réhodyne mais aucun changement.
Aucune fuite n'est visible.
J'utilise un DEDL de chez perkin elmer que j'ai nettoyé (nébulisateur à 120°C évaporateur à 80°C et débit de gaz à 2.8L/min).

Voilà donc je ne sais plus trop comment faire pour régler ce problème!

Si quelqu'un a une idée à me proposer...

Merci d'avance à tous!

lolo38

Bonjour,

Peux-tu préciser la nature de la substance injectée ainsi que la nature chimique précise (au besoin tu contactes le fabricant) du greffage aminé de ta phase stationnaire?

Bien à toi.