Bonjour !!
Une petite question :
j'ai du mal a comprendre comment on choisit entre une HPLC en phase normale et une HPLC en phase inversée...
Il me semble que les chromatogrammes obtenus avec l'une et l'autre methodes sont les memes mais inversés. Mais que la phase normale est moins facilement reproductible donc on l'utilise moins....
En bref pourquoi on utilise encore l'HPLC en phase normale?? pour quels types de composés on utilise imperativement la phase normale??
Merci de votre aide!!
Ca dépend de la polarité des composés a analyser :
La phase normale est constituée de gel de silice. Ce matériau est très polaire. Il faut donc utiliser un éluant apolaire. Ainsi lors de l'injection d'une solution, les produits polaires sont retenus dans la colonne, contrairement aux produits apolaire qui sortent en tête. L'inconvénient d'une telle phase, c'est une détérioration rapide au cours du temps du gel de silice, ce qui entraîne un manque de reproductibilité des séparations.
La phase inverse est majoritairement composée de silice greffées par des chaînes linéaires de 8 ou 18 atomes de carbones (C8 et C18). Cette phase est apolaire et nécessite donc un éluant polaire (ACN, MeOH, H20). Dans ce cas, ce sont les composés polaires qui seront élués en premier.
