Répondre à la discussion
Affichage des résultats 1 à 3 sur 3

Préparation de l'ADN [biochimie]



  1. #1
    bb_butty

    Préparation de l'ADN [biochimie]


    ------

    Bonjour, mon TP s'intitule Préparation d'ADN à partir des gonades de hareng
    Cette préparation nécessite un certain nombre d'étapes faisant intervenir différents agents chimiques et physico-chimiques. L'intérêt de chacune de ces étapes sera vu en TD.
    Sont bien gentils mais on a pas eu le TD concernant ce TP (et je sens que la colle sera vicieuse !!), alors je veux bien faire avec mes souvenirs de DUT mais ma mémoire risque de me faire défaut d'où ma sollicitation

    - dilacérer à 0°C ==> libération des cellules
    - ajouter 10 mL de tampon Tris 10 mM/ EDTA 1 mM pH 7,6 ==> stopper action des enzymes ou libération du contenu cellulaire ??
    - ajouter x mL de SDS ==> dénaturation des protéines
    - ajouter un volume de chloroforme / acool isoamylique ==> j'en ai aucune idée

    Après centrifugation, précipitation dans l'éthanol conservation à - 4°C ça je sais

    Merci d'avance pour la réponse

    -----

  2. #2
    raymond_la_science

    Re : Préparation de l'ADN [biochimie]

    Bonjour bb_butty
    Dilacérer à O° pour rompre le tissus
    tampon TRIS /EDTA complexation des ions Mg2+ cofacteurs des DNases
    SDS attaque couche lipidique des cellules et rupture
    CHCL3/Isoamylique précipitation des protéines
    centrifugation et récupération surnagenant puis précipitation dans l'éthanol.
    Cordialement
    rls

  3. #3
    bb_butty

    Re : Préparation de l'ADN [biochimie]

    Merci bien, j'ai pas eu de colle mais ça me servira pour la suite

Discussions similaires

  1. l'adn
    Par uoxel dans le forum Biologie
    Réponses: 6
    Dernier message: 18/03/2007, 19h32
  2. l'ADN
    Par hoda dans le forum Biologie
    Réponses: 12
    Dernier message: 29/08/2006, 16h37
  3. débouchés biochimie et SDV parcours biochimie??
    Par rmaria dans le forum Orientation après le BAC
    Réponses: 2
    Dernier message: 02/03/2006, 18h25
  4. débouchés biochimie et SDV parcours biochimie, la meme chose??
    Par rmaria dans le forum Orientation après le BAC
    Réponses: 0
    Dernier message: 02/03/2006, 16h29
  5. amplification de l'ADN
    Par delft dans le forum Biologie
    Réponses: 10
    Dernier message: 02/02/2005, 08h29