Colonne C-18 bouché

[invite790dff96]

Bonjour à tous,

J'ai une bonne question pour vous et j'aimerai savoir si quelqu'un à rencontré un pareil problème.

On effectue dans le cadre d'une recherche l'analyse de composéorganique dans l'eau et le sol. On a mit au point la méthode pour l'eau et elle fonctionne bien. Ca ce fait sur une Zorbax Eclipse XBD-C18 avec une phase 95% eau et 5%.

Donc les analyses des contaminants dans l'eau a bien été mais quand ont est tombé sur ceux dans le sol (extrait par contact avec solvant et ultrason pendant 18 h, et filtré 3 fois sur 0.45 micron) les échantillons semblent bouché la précolonne après 6-10 échantillons. Commence à couter cher de l'échantillon. On a essayé de la nétoyer avec de l'isopropanol à 70-80% sans succès. Les produits étant de moins en moins retenu.

Seule différence avec les échantillons d'eau, le sol... On commence à penser que le sol, même celui sans contamination mais provenant du même endroit, contient quelques choses qui bloque la précolonne rapidement.

Quelqu'un a déjà rencontré un tel problème? Avez vous une idée e comment nétoyer la précolonne?

Merci

Shadu
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[vanadis]

Les problèmes avec la précolonne c'est la particularité du travail avec le sol
Pour nettoyer la précolonne essayez d'abord quelques dissolvants : methanol, acetonitril, isopropanol et variez leurs concentrations.
Mais pour l'avenir, organisez la protection plus sérieuse de le système au total, comme un exemple - quelques filtres in-line

bonne chance

[invitec2cb4f34]

Ca donne quoi au niveau de l'évolution de la pression. Quel est le débit et composition éluant. Le problème porte uniquement sur la pré-colonne?


Un backwash à 0,2 ml/min pendant 1 nuit peut être efficace....

[inviteb7fede84]

Bonjour. Je ne suis pas trop spécialiste de l'analytique, mais j'ai entendu dire qu'en dernière extrémité on pouvait retourner la colonne, cad faire passer le flux à l'envers pour la déboucher...ce n'est pas très conseillé, mais pour une précolonne, ce n'est pas un gros risque.

[A voir en vidéo sur Futura]

[invite790dff96]

Merci à tous!

Sans avoir totalement résous le problème ca a évolué.

1) On a réussit à néttoyer la précolonne et nos pics sont revenu à leur temps de rétention initial. Un lavage avec du Méthanol 100% à été la solution. C'est logique car contrairement à la méthode utilisé normalement, qui extait le sol à l'acétonitrile, nous ont doit le faire au méthanol... Donc notre conchonnerie s'y dissous et une fois dans le HPLC, ou est éluer avec une part d'eau, il "précipite" et bloque le système. Car à la méthode d'origine, avec acétonitrile, il n'ont jamais eu ce problème.

2) On s'est apercut que l'étudiante qui à préparer l'étude (fin de maitrise) avait pas fait tous ses devoirs. C'est un peu normal car elle n'est pas en chimie mais dans une matière connexe. Et il est pas inhabituel d'ajouter du BaCl2 dans ce genre d'échantilon pour précipité la cellulose et ses dérivés... Est-ce que notre conchonnerie est de la cellulose? ETK il y a quelques choses qui précipite quand on ajoute le BaCL2. A voir....

Donc j'ai instauré un ajout du BaCl2 (sol 2%) dans les échantillons à venir pour en évaluer l'effet. Et ce midi je fais une extration au Soxlet avec du Methanol du sol "blanc" pour tenter de récolter une bonne quantité de la substance pour l'analyser et l'identifier au RMN et FTIR.

Je vous en redonne des nouvelles et merci encore.