fonctions thiols

[invitef332d061]

bonjour,
le but de mon tp est e doser les fonctions thiols de l'ovalbumine.
j'ai tracé la cinétique de dénaturation de la protine pour démasquer les fonctions -SH (absorbance en fonction du temps), puis la courbe qui m'a permis de déterminer le coefficient molaire du DTNB (absorbance en fonction de la concentration en cystéine) qui est le réactif qui nous permet de doser le nombre de fonctions thiols.

comment à partir de tout cela je peux déterminer le nombre de fonctions thiols accessibles au DTNB par molécule d'ovalbumine native ??
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[invitea4905f11]

Hum hum vive la bioch àDijon! J'ai fait le même tp que toi, et je me pose les mêmes questions. T'es dans quelle filière? et t'as trouvé finalement ou pas?

[invite230c609a]

bonjour,
à mon avis tu dois avoir un graphique ou un tableau d'étalonnage qui va lier la quantité de DTNB au nombres de fonctions thiol

[invitef332d061]

oui j'ai trouvé, en fait on a eu une courbe de dénaturation, donc on prend l'absorbance où la protéine est entièrement dénaturée. ensuite on calcule la concentration avec le coefficient molaire calculé avec le DNTB. puis on fait un rapport avec la concetration d'ovalbumine. tu comprend?

[A voir en vidéo sur Futura]

[invite230c609a]

ok j'ai compris