Comment faire pour préparer ce tampon TRIS
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Comment faire pour préparer ce tampon TRIS



  1. #1
    invitee7b29f0a

    Comment faire pour préparer ce tampon TRIS


    ------

    Bonjour,
    S’il vous plait comment faire pour préparer ce tampon ?
    Je lis dans un document :
    Glandes digestives ont été homogénéisés dans un tampon Tris (Tris 50 mM, NaCl 150 mM, pH 7,4, 0,1% antiprotéase cocktail,
    1 mM DTT [dithiothreitol]) dans un 1 / 5 w / v (poids / volume) ratio.

    Premièrement, je fais comment pour savoir 50mM de tris est égale à combien de gramme.
    Deuxièmement, comment dois-je procéder ? Je vais mettre la quantité désignée du tris dans un flacon, puis celle du nacl, ainsi de suite puis ajouter 1 litre d’eau distillée ? Dois-je procéder de cette manière ?
    Troisièmement, comment régler le ph à 7,4 ?
    En fin ça veux dire quoi « dans un 1 / 5 w / v (poids / volume) ratio ».
    Merci beaucoup pour votre aide.

    -----

  2. #2
    vpharmaco
    Animateur Biologie

    Re : Comment faire pour préparer ce tampon TRIS

    Bonsoir,

    alors pour préparer par exemple 1 L de tampon
    - il te faut par exemple du NaCl 150 mM. Cela veut dire que dans 1L tu dois avoir 0,150 mol de NaCl. La masse molaire du NaCl est de 58,4 g/mole donc il te suffit de faire le calcul m(NaCl)=0,150*58,4= 8,76g de NaCl pour 1L de solution
    -Tu fais pareil pour les autres composés (la masse molaire de chacun se trouve en général sur le flacon ou tu peux la trouver sur le site de ton fournisseur)

    Donc, tu pèses ces différents composés et tu complètes à 1L avec de l'eau.
    Une fois que la solution est bien homogène, tu ajustes petit à petit, sous agitation, le pH en ajoutant de l'acide chlorhydrique ou de la soude jusqu'à obtenir pH=7,4.

    Pour le ratio, je pense que cela veut dire que pour 1g de glande digestive, tu utilises 5 mL de tampon.

    Cordialement

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