Dosage ELISA
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Dosage ELISA



  1. #1
    invite32ef86e7

    Dosage ELISA


    ------

    Bonjour,

    Je réalise un dosage ELISA. Après avoir ajouté mon anticorps de détection (HRP), j'ajoute le substrat (TMB). La solution devient alors bleue. Puis, à l'ajout de la solution d’arrêt, la solution devient jaune.

    Ma question est la suivante : par quel phénomène la solution passe du bleu au jaune ?

    Cordialement,

    -----
    Dernière modification par Flyingbike ; 04/06/2017 à 21h56. Motif: correction jaune-> bleu

  2. #2
    HarleyApril

    Re : Dosage ELISA

    Bonjour

    La biochimie se traite plus en bio qu'en chimie ...

    Déplacé en conséquence

    Pour la modération

  3. #3
    Flyingbike
    Modérateur*

    Re : Dosage ELISA

    Désolé HarleyApril mais je pense qu'un chimiste répondra mieux (les biologistes utilisent tous les jours cette réaction mais j'en connais pas un seul qui t'expliquera ce qui se passe moléculairement quand tu ajoutes du H2S04 )

    Pour simplifier il s'agit de déterminer pourquoi cette espèce (la forme réduite à droite) qui est bleue en solution, devient jaune en présence d'un acide fort

    Nom : Tetramethylbenzidine-TMB-substrate__GTX78422-1.jpg
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    Dernière modification par Flyingbike ; 04/06/2017 à 22h01.
    La vie trouve toujours un chemin

  4. #4
    invite32ef86e7

    Re : Dosage ELISA

    Salut Flyingbike

    On m'a émit cette hypothèse "La solution stop est un acide fort. Le pH est alors modifié. Cela hydrates les doubles liaisons pour former des alcools.*On perd ainsi la conjugaison donc la couleur bleue au profit de la couleur jaune" Mais je ne comprends pas car selon la réaction chimique, il n'y a pas la formation d'alcool...

  5. A voir en vidéo sur Futura
  6. #5
    HarleyApril

    Re : Dosage ELISA

    Bonsoir

    Ce serait plutôt l'hydrolyse des imines en cétones.
    Il faudra que j'aille voir dans JOC 1981 3056 si c'est bien ça qui est jaune.

    Cordialement

  7. #6
    HarleyApril

    Re : Dosage ELISA

    Ça y est, je l'ai trouvé sur internet, c'est bien ça
    http://www.sinorefine.com/template/o10.htm

    Cordialement

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