Bonjour,
Je suis entrain de travailler sur un TP similaire à celui ci en lien : http://www.perrin33.com/polys/protei...-michaelis.pdf
J'ai cependant 2 questions et j'aimerai savoir si j'ai bien compris
Tout d'abord petite précision la pratique est la meme. On fait reagir un (ONPG) orthonitrophényl-beta-D-galactoside avec de la beta-galactosidase pour obtenir du (ONP) orthonitrophénol et du galactose
Pourquoi etudier l'absorbance à 420 nm ?
On etudie l'absorbance à 420 nm car on etudie la formation du produit ONP à partir de la reaction enzymatique de ONPG. De plus un produit de couleur jaune, absorbe au maximum de 420 nm
Pourquoi ONP absorbe dans le visible à la difference de ONPG qui n'absorbe pas dans le visible ?
Le produit ONP est de couleur jaune alors que le substrat ONPG est incolore. Ce qui veut dire que ONP absorbe dans le visible la couleur bleue à la difference de ONPG qui est incolore. Il a donc une absorbance qui est nulle.
Note supplementaire http://stl.bgb.liberte.free.fr/micro...ches/onpg1.pdf
Etes vous d'accord avec moi pour ces deux questions ?
Merci pour votre aide, je remercie encore une fois cette super communauté !
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