Bonjour,
J'ai un exercice à faire, et je ne sais pas par où commencer.
voici l'énoncé.
L'hexokinase catalyse la fixation de phosphate sur le glucose. Pour suivre la purification de cette enzyme, on
mesure la fixation de phosphate radioactif provenant l'ATP marqué au 32P sur le glucose :
glucose + ATP --> glucose-6-phosphate + ADP
Le mélange réactionnel (1 ml) renferme toutes les substances nécessaires à la réaction. Le volume d'extrait
enzymatique utilisé est de 0,1 ml. L'activité spécifique de l'ATP est de 2000 coups par minute par nmol (CPM /
mmol). Les résultats obtenus sont présentés dans le tableau suivant :
1) Calculer l'activité enzymatique de l'extrait en unité par ml. 1 UE est la quantité d'enzyme catalysant la
fixation de 1 nmol de P / minute dans les conditions expérimentales.
(il me semble qu'il y a une erreur dans l'énoncé... pour l'activité spécifique, un coup c'est en nmol, un autre en mmol...)
dans mon cours, il est écrit que l'activité spécifique (AS) = activité enzymatique (AE) / unité de masse de l'enzyme (m)
AS= AE/m
j'ai AS (2000CPM/mmol) mais je n'ai pas m
m = n x M mais je n'ai ni n ni M
c'est aussi écrit que AE: µmol/min = Vmax
sauf que Vmax, je ne sais l'identifier qu'avec la courbe de Michaelis (le plafond) ou la courbe de Linewcova-Bunk
La courbe de Linewcova-Bunk apparait dans mon cours, mais je serai bien incapable de la reproduire.
La courbe de Michaelis, il me faut la vitesse initiale en fonction de la concentration en substrat. Et impossible à faire avec ce qui est donné dans l'énoncé.
Pour résumer, je suis totalement perdue.
(le pire dans tout ça c'est que je saisie pas bien cette histoire de CPM, pas plus que "l'UE" de la question).
J'espère que vous pourrez me mettre sur la bonne voie.
Merci
cordialement, enzymette
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