Plasmide, carte de restriction, clonage, séquençage, et mutations...

[invite3b384b75]

Bonsoir à tous,

Je suis actuellement en plein dans mes révisions de partiels, et je me suis retourné le cerveaux sur un exercice de biologie moléculaire. Je suis à peu près sur qu'il est très simple, seulement voilà je me suis totalement embrouillé.
Concrètement, j'ai un peu de mal à faire le lien entre la représentation de notre site de restriction, et les différents gel obtenus après digestion. Bref quelqu'un peut-il se lancer, me faire voir comment il faut analyser ce genre de doc ?
Voici cet (énorme) exercice.

En vous remerciant.


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[chamouulox]

Q2 :
pTP c'est ton plasmide "pur"

type1 même profil que pour le plasmide vide, c'est le plasmide refermé sans l'insert, tu n'amplifies que le plasmide

type2a c'est le profil attendu pour E, B et S (distances S1 <-> extrémités amplifiées = 1,5 + 10,4 (7.5 de l'insert + 2,9 du plasmide)

type2b B1 et E1 pas de changement + t'as une modification de la position du site de restriction pour S1 : soit double mutation pour perdre le premier site et en gagner un nouveau a proximité du B1, soit t'as un petit fragment du gène de capside qui s'est inversé.

Q1 et Q3 c'est de la méthodo t'as tout dans ton cours
Q5 et Q6 obvious,

Bon courage,

Cham

[invite3b384b75]

Merci pour ta réponse Chamouulox.

Lorsque on observe le profil de migration pour chaque enzyme de restriction (typê 2a et 2b), pourquoi voit-on 2 taches? J'ai du mal a voir à quels fragments restreints correspondent les taches