Bonjour les gens , je suis nouveau ici , j'amerai bien avoir une réponse rapide à cette exercice SVP les gens URGENTS , peut-etre il va se poser en controle
1. TECHNIQUES D’ETUDE DES PROTEINES
1.1 Le volume nécessaire à l’élution (Vel) d’une protéine sur une colonne de gel filtration est
fonction inverse du poids moléculaire(Mr). La courbe d’étalonnage ci-dessous est tracée à
partir des résultats reportés dans le tableau :
Protéine Mr Vel (ml))
bleu de dextran* 106 85
lysosyme 14 000 200
chymotrypsinogène 25 000 190
ovalbumine 45 000 170
sérum albumine 65 000 150
aldolase 150 000 125
uréase 500 000 90
X ? 130
* le bleu dextran est un polymère de haut PM
a. Expliquer l’ordre d’élution des protéines.
b. Evaluer le PM de la protéine inconnue X.
1.2 Une protéine étudiée par gel filtration dans un tampon aqueux à pH7 présente un poids
moléculaire apparent de 160.000 daltons. Si cette protéine est soumise à une
électrophorèse sur gel en présence de SDS la révélation montre 2 bandes
correspondant à des poids moléculaires apparents de 50000 et 30000.
• Expliquer ces résultats.
1.3 Expliquer et commenter ces affirmations.
a. Les protéines sont très peu solubles à leur point isoélectrique (pHi).
b. Pour une valeur de pH supérieure à son pHi une protéine est chargée négativement et
pour une valeur de pH inférieure à son pHi une protéine est chargée positivement.
1.4 Une solution contenant de l’albumine (pHi= 4,6), de la β-lactoglobuline (pHi = 5,2) et du
chymotrypsinogène (pHi= 9,5) est chargée sur une colonne de DEAE cellulose à pH 5,4.
(Le DEAE est une molécule chargée positivement)
La colonne est éluée par un gradient de NaCl de concentration croissante.
• Proposer un ordre d’élution de la colonne pour ces protéines.
1.5 Soit une protéine oligomérique d’un poids moléculaire (PM) de 240 000 Daltons. Sa
structure quaternaire est étudiée par la détermination des poids moléculaires à l’issue de
divers traitements :
a. Traitement par le mercaptoéthanol 0,1M : donne uniquement des structures
protéiques d’un PM de 120 000 D.
b. Traitement par l’urée 4M : donne uniquement des structures protéiques d’un PM de 80
000 D.
c. Traitement par le mercaptoéthanol 0,1M et l’urée 4M : donne uniquement des
structures protéiques d’un PM de 40 000 D.
• Quels sont les effets des différents traitements ?
• Quelle est la structure quaternaire de cette protéine ?
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veuillez jettez un coup d'oeil sur la pièce jointe , peut-etre il vous sera utile. ^^
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