[Bio][M1-M2]clonage difficile.

[piwi]

Je vous propose ici un petit chose pas commode.
Le but du jeu est de parvenir à cloner l'insert proposé dans le polylinker du vecteur (région après la flèche bleue) également proposé dans le but d'exprimer la protéine de fusion dans des cellules type COS ou HeLa. Vous disposez des cDNA produits à partir du tissu exprimant votre gène. Le cDNA recherché fait 3.5 kpb

Vous ne disposez que de peu de temps (1 semaine). Décrivez votre approche expérimentale pour satisfaire à vos objectifs.


Cordialement,
piwi
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[piwi]

Un second clonage peu évident.

Vous disposez de deux vecteurs et vous souhaitez faire passer l'insert du plasmide donneur dans le plasmide receveur. L'insert est grand, peu exprimé dans les tissus, il n'est pas question d'essayer de le sortir par PCR. Vous ne pouvez procéder que par restriction.

Bon courage,
piwi

[piwi]

correction d'une petite erreur dans la carte du plasmide receveur. Il n'y a pas de site SmaI entre BamHI et BglII. Ce serait bien trop facile sinon

[MaliciaR]

correction d'une petite erreur dans la carte du plasmide receveur. Il n'y a pas de site SmaI entre BamHI et BglII. Ce serait bien trop facile sinon

Clair Mais il y en a un dans le VP16. Ca compte?
Pff, je ne comprends pas ce qui m'arrive : je ne fais plus de manips et je me choppe à résoudre un exo clonage... C'est grave, Docteur?

[A voir en vidéo sur Futura]

[piwi]

Ah bah oui ca compte. J'en oublie des difficultés parfois. C'est tellement tordu de toute façon...