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cinétique béta galactosidase



  1. #1
    zimzum18

    cinétique béta galactosidase


    ------

    Bonjour à tous, j'ai un problème pour mon compte rendu de tp d'enzymologie.

    Je décris le TP :

    placer dans un tube a essai : 0,2ml d'ONPG
    2mL tampon pH = 7
    0,7 mL d'eau distillée

    préincuber 5min à 37°C.

    Ajouter 100µL de béta galactosidase et déclancer simultanément le chronomètre.

    Replacer au bain marie

    Au bout de t=3min exactement arréter la réaction en ajoutant 2mL de Na2CO3 EDTA et placer en dehors du bain marie.

    Mesurer l'absorbance.

    Question :
    Vérifier que T=3min soit compris dans la période initiale

    Calculer la vitesse initiale brute


    Comment calculer la vitesse initial brute quand on a pas de courbe??

    -----

  2. #2
    zimzum18

    Re : cinétique béta galactosidase

    En fait il faut calculer avec l'absorbance 0 et t=0, et l'absorbance a 3minutes, avec ça on calcule le coeff directeur?

  3. #3
    lipstyka

    Re : cinétique béta galactosidase

    j'espère que tu n'as pas déja rendu ton compte-rendu, sinon ma répone ne te servira a rien. en tout cas, rassure toi, c'est bien (A à 3 min - A 0)/t. en effet, tu dois surement encore etre dans la phase stationnaire (tangente à l'origine confondue avec la courbe), donc meme si tu avais une courbe, tu aurais eu le meme résultats (points alignés).
    bon courage pr la suite.

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