cinétique béta galactosidase

[invite44594c28]

Bonjour à tous, j'ai un problème pour mon compte rendu de tp d'enzymologie.

Je décris le TP :

placer dans un tube a essai : 0,2ml d'ONPG
2mL tampon pH = 7
0,7 mL d'eau distillée

préincuber 5min à 37°C.

Ajouter 100µL de béta galactosidase et déclancer simultanément le chronomètre.

Replacer au bain marie

Au bout de t=3min exactement arréter la réaction en ajoutant 2mL de Na2CO3 EDTA et placer en dehors du bain marie.

Mesurer l'absorbance.

Question :
Vérifier que T=3min soit compris dans la période initiale

Calculer la vitesse initiale brute


Comment calculer la vitesse initial brute quand on a pas de courbe??
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[invite44594c28]

En fait il faut calculer avec l'absorbance 0 et t=0, et l'absorbance a 3minutes, avec ça on calcule le coeff directeur?

[invitebc4d5f36]

j'espère que tu n'as pas déja rendu ton compte-rendu, sinon ma répone ne te servira a rien. en tout cas, rassure toi, c'est bien (A à 3 min - A 0)/t. en effet, tu dois surement encore etre dans la phase stationnaire (tangente à l'origine confondue avec la courbe), donc meme si tu avais une courbe, tu aurais eu le meme résultats (points alignés).
bon courage pr la suite.