culture cellulaire

[invitef59a79ea]

bonjour,
j'aimerai savoir à quoi servent la collagénase, la trypsine et l'EDTA lors d'une même culture cellulaire.
merci
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[inviteec077029]

la trypsine est une enzyme qui rompte les liens intercellulaires et l'EDTA est chelatant

[Novocaine]

Hello!
Les collagènases sont des enzymes qui lysent le collagène.
La trypsine c'est une endoprotéase c'est à dire que c'est une enzyme qui rompt les liaisons peptidiques au centre da la chaine(par rapport à une lyse terminale). La trypsine rompt la liaison lysine arginine uniquement: c'est à dire que ça casse les chaines protéiques uniquement à ce niveau là. C'est une protéine qui joue un rôle dans la digestion. Ce que dit bacillus 100 n'est pas exact.
l'EDTA sert à créer des complexes métalliques stables(ie: chelatant ou complexant)

Ciao,

[invitef59a79ea]

d'accord, mais à quoi sert de casser les liaisons peptidiques ?

[A voir en vidéo sur Futura]

[invite77749503]

Il faut que tu lises ça
Tu comprendras tout
http://www.icampus.ucl.ac.be/courses...yotype-01.html

[Novocaine]

Bah pour l'organisme ça sert à la digestion déjà Faut couper les protéines en acides aminés ou en peptides pour que ces molécules soient absorbées au niveau de la paroi intestinale.
En biochimie, ça sert à déterminer la séquence des acides aminés d'une protéine donnée! Si on a une séquence protéique et qu'après action d'une trypsine, il se forme 2 segments et on saura que cette protéine ne possède qu'une liaison lysine-arginine. Il existe d'autres enzymes capables de couper à d'autres endroits d'autres peuvent couper des liaisons terminales peu importe l'acide aminé au bout etc etc... Avec tout ça on est très content et on arrive à déterminer la séquence exacte de la protéine!
Les collagènases peuvent servir,entre autres, au renouvelement de la matrice extra cellulaire(faut détruire pour reconstruire).
L'EDTA a divers rôles... cf:wikipedia

Ciao,

[invitef59a79ea]

oki!!! merci beaucoup pour votre aide !

[Vinc]

La trypsine et l'EDTA favorisent le décollement des cellules : la trypsine coupe après les AA basique des protéines d'adhérence et l'EDTA réduit la concentration extracellulaire en calcium ce qui inactive potentiellement les cadhérines, nescessaires aux adhésion cellules/cellules.

V.