quantification des protéines

[invite50cb7a9c]

Bonjour,
je suis entraine de lire un article scientifique sur l'analyse proteomique.
pour quantifier les proteines, ils ont utilisé de la methionine marqué au soufre 35,
ils ont fait une electrophorese en 2D, ensuite ils ont autoradiographié le gel, ensuite ils disent qu'ils ont excisé les spots et qu'ils ont fait une scintillation liquide puis denombrement. d'autre part, ils disent qu'ils ont excisé d'autres spots et qu'ils ont analysé les acides aminés.
Je ne comprend pas à quoi servent toutes ces etapes, laquelle parmet de quantifier les proteine?
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[invite50cb7a9c]

je crois que c'est plutot le comptage en scintillation liquide, si vous connaissez le principe ça serait sympa de me le dire

[gorben]

salut,

L'autoradiographie permet de reveler les spots sur le gel 2D. Ils decoupent les spot et ils font une scintillation liquide pour quantifier (la radiactivite est proportionelle a la quantite de proteine), puis ils envoient la bande en MS ou edman pour avoir la sequence en AA...
Voila brievement ce qu'ils ont fait.

A+

[invite50cb7a9c]

merci pour l'explication

[A voir en vidéo sur Futura]