Bonjour,
Je rencontre un probleme au cours d une experience de chimioluminescence visant a quantifier des quantités d H2O2 grace a du luminol dont le catalyseur serait le ferricyanure. La reaction catalisée transforme le luminol en un composé exité qui revient a son etat initial en emmettant de la lumiere. Cette reaction consomme alors l H2O2 et le luminol (qui est en exces) et n est donc pas reversible. L'H2O2 etant alors limitant. L emission de lumiere est donc logiquement ponctuelle, et d apres ce que j en ai trouvé cesse apres 30secondes. Donc, lors de la detection de la luminescence nous devrions avoir un pic lors de l injection de ferricyanure et un retour au niveau de base (bruit de fond de l appareil) apres environ 30 secondes. Je ne crois pas me tromper jusque la.
Mon probleme est le suivant, mes courbes presentent trois profils differents et ne s accordent pas avec ce que je viens d ennoncer. Elles ont une forme de sigmoide avec un plateau, ce qui impliquerait qu il y a encore de la luminescence, et donc que la reaction ne se termine pas. Toutefois si la quantité d H2O2 correspondait a l integrale de la courbe, cela n expliquerait pas pourquoi pour defferentes quantités d H2O2 la quantité de luminescence soit proportionnelle. J ai besoin de savoir a quelle moment je dois choisir ma valeur de luminescence max lors de l essai pour interpreter mes resultats.
Quelqu un peut il m expliquer les profils type qu l on devrait obtenir et comment ils s expliquent?
Merci
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