Calcul cellulaire [Hémacymètre]

[invite89dbe67a]

Bonjour tout le monde!

J'ai des problèmes de comptage cellulaire et j'ai besoin de votre aidre!

Donc voici les données :

-Le volume de milieu de culture : 5 mL
-On a utilisé 10 uL de culture et 50 uL de bleu trypant pour la coloration des cellules
-Selon le compatge de l'hémacymètre, il y avait 43 cellules dans un carré primaire

Mon problème : En laboratoire, nous faisons le même type de problème, mais nous utilisons 10 uL de culture dans 90 uL de bleu trypant.

Donc 1) Trouver le nombre de cellules. Moi je ferais :

43*10^4*10 uL

Je me demande donc si, en laboratoire, lorsque je fais *10 uL, est-ce que je multiplis vraiment par 10 uL - vu que sous l'hémacimètre, un carré primaire contient 1 uL de culture - ou est-ce que je multiplis par un facteur de dillution?

Pour trouver la concentration, on multiplis la réponse de 1) par 5 mL, ça, ça va!

2) Trouver le nombre de cellules après centrifugation si on resuspends dans 2 mL de milieu de culture.

Moi je crois qu'il faut faire :

La réponse trouvée en 1) * 2 mL

Merci beaucoup de m'aider!
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[piwi]

1 carré contient 1 µl. Donc 43 cellules/µl. Vous aviez 60 µl totaux donc 2 580 cellules. Ces cellules étaient entièrement comprises dans les 10 µl de milieu initiaux. 258 cellules/µl
Du coup pour 5ml on aura 2580x5000= 1 290 000 cellules dans la culture.

Pour la question 2 la question est curieuse.
Le nombre de cellule n'est pas modifié. Si on a deux pommes dans un panier et qu'on les mets dans un petit sac, on a toujours deux pommes.
Si on a 1,3.10⁶ cellules dans 5 ml, qu'on les prend et qu'on les met dans 2 ml, on a toujours 1,3.10⁶ cellules.
En revanche, la concentration a changé.
On avait 2 580 cellules/µl et à présent on en a 6 450/µl.

Cordialement,
piwi