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Activité enzymatique



  1. #1
    silverblaze

    Activité enzymatique


    ------

    Bonjour,

    J'ai eu un TP sur l'activité enzymatique de la phosphatase alcaline. Il y a eu plusieurs manipulations (avec et sans inhibiteur), et avec les résultats d'absorbance qu'on a mesuré, on doit déterminer le Km et le Vmax à partir de différentes méthodes de linéarisation (Lineweaver & Burk, Eadie & Hofstee et Hanes).

    Focalisons-nous par exemple sur la méthode de Lineweaver & Burk (ordonnée en min/dA et abscisse en 1/millimolaire) pour une réaction sans inhibiteur.

    L'équation de la droite est y=4,8998x + 4,9996.
    J'ai trouvé le Km (Km=0.98 mM).
    J'ai trouvé le Vmax (Vmax=0.20 dA.min-1).
    Le volume réactionnel est de 2mL.
    Le coëfficient d'extinction molaire est de 15115.5 M-1.cm-1.

    La seule chose que je ne comprends pas, c'est comment passer de Vmax en dA.min-1 en mol.min-1.

    Sur le rapport, il y a 3 points intermédiaires pour y arriver:

    A=
    C=
    n=

    La concentration on la calcule avec l'équation de Beer-Lambert mais le A je sais pas d'où on doit le tirer...

    Merci pour votre aide

    -----

  2. #2
    Mrikzik

    Re : Activité enzymatique

    Et bien A tu l'as puisque tu a dA.
    Pour info la loi de Beer-Lanbert est aussi valable avec les vitesses. cad dA=dC*E*L

  3. #3
    silverblaze

    Re : Activité enzymatique

    merci! je ne savais pas qu'on pouvait aussi l'utiliser avec les vitesses, mtn j'ai compris!

    à+

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