Bonjour,
J'ai eu un TP sur l'activité enzymatique de la phosphatase alcaline. Il y a eu plusieurs manipulations (avec et sans inhibiteur), et avec les résultats d'absorbance qu'on a mesuré, on doit déterminer le Km et le Vmax à partir de différentes méthodes de linéarisation (Lineweaver & Burk, Eadie & Hofstee et Hanes).
Focalisons-nous par exemple sur la méthode de Lineweaver & Burk (ordonnée en min/dA et abscisse en 1/millimolaire) pour une réaction sans inhibiteur.
L'équation de la droite est y=4,8998x + 4,9996.
J'ai trouvé le Km (Km=0.98 mM).
J'ai trouvé le Vmax (Vmax=0.20 dA.min-1).
Le volume réactionnel est de 2mL.
Le coëfficient d'extinction molaire est de 15115.5 M-1.cm-1.
La seule chose que je ne comprends pas, c'est comment passer de Vmax en dA.min-1 en mol.min-1.
Sur le rapport, il y a 3 points intermédiaires pour y arriver:
A=
C=
n=
La concentration on la calcule avec l'équation de Beer-Lambert mais le A je sais pas d'où on doit le tirer...
Merci pour votre aide
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