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Expérience n°1
Des cellules somatiques animales (2n=6) sont mises en culture dans une série de boîtes de
Pétri où elles poussent en formant un tapis cellulaire au fond des boîtes. Lorsque la croissance
a démarré, le nombre de cellules par surface de tapis cellulaire est déterminé à différents
temps :
Temps to to+40h to+80h to+120h To+140h to+160h
Cellules/cm2 2.5 103 104 4.104 1.6 105 2 105 2 105
A to+160h, le milieu nutritif n'est pas épuisé.
a) Quelle est la caractéristique de cette croissance entre to et to+120h ?
b) Quelle est la durée du cycle de ces cellules pendant la phase de croissance ?
Au temps to+80h, de la cytidine 3H est ajoutée au milieu de culture de deux boîtes A et B.
Dix minutes plus tard, les cultures sont lavées pour éliminer la cytidine 3H non incorporée.
L'échantillon A est soumis à une autoradiographie. Après révélation, les cellules sont
examinées au microscope photonique; elles présentent toutes de nombreux grains d'argent.
L'échantillon B est traité de manière à rendre les cellules perméables, puis il est soumis à
l'action de la ribonucléase. Les cellules sont lavées et après autoradiographie, 30% seulement
des cellules présentent des grains d'argent.
c) Interprétez les résultats obtenus avec ou sans traitement à la ribonucléase.
d) La culture est-elle synchrone ou asynchrone ?
e) Les résultats obtenus permettent d'analyser une phase du cycle cellulaire.
Laquelle ? Quelle est sa durée ?
f) À partir de la préparation cellulaire B, quelle mesure simple effectueriez-vous pour
déterminer la durée de la mitose ? Un microscope est supposé être mis à votre disposition.
Les résultats de cette mesure ont permis de déterminer que la mitose dure deux heures.
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