Précipitation des protéines.

[invitec4d2e6d6]

Bonjour,

Je réalise un protocole pour essayer de savoir si le style cristallin de l'estomac des bivalves est formé d'une seule ou de plusieurs enzymes.

Il y a une étape ou j'aimerais bien précipiter un maximum de protéines présentes dans ma solution seulement je ne sait pas trop quelle méthode employer (je pencherais plutôt pour un solvant organique, mais lequel?). les protéines récupérée me serviront à faire une électrophorèse.

Que me conseillez vous de choisir comme technique.

Merci d'avance.
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[invitec9f0f895]

SAlut

Généralement les protéines sont précipitées en présence de TCA.

YOyo

[invitec4d2e6d6]

C'est le solvant pour lequel je penchais oui. Une précipitation à l'éthanol ou à l'acétone est aussi possible.

[inviteb6144ea4]

Une précipitation à l'éthanol ou à l'acétone est aussi possible.

Oui ça marche très bien: précipitation dans 4 à 5 volumes d'acétone (minimum 20 min à -20°C), centrifugation pour récupérer les protéines (15000g pendant 10 min) + 2 ou 3 lavages

[A voir en vidéo sur Futura]

[inviteecedecbd]

Bonjour

Je sais aussi que le sulfate d'ammonium à forte concentration est très utilisé pour faire précipiter des protéines

a+

[invite7249a892]

Hello à tous;
Il y’a aussi la précipitation au phénol, PCA (acide perchlorique), le sulfate de zinc ou au tungstate de sodium et la précipitation thermique, mais pour le PCA et le sulfate de zinc et au tungstate de sodium sont dangereux car l'un est explosif(PCA) et le sulfate de zinc qui est une technique un peu complexe, particulièrement si on utilise le Ba(OH) 2 qui doit être conservé à l'abri de l'air.
Cordialement,
Katie.