Répondre à la discussion
Affichage des résultats 1 à 4 sur 4

Extraction ARN



  1. #1
    pyroseq

    Red face Extraction ARN

    Bonjour,

    j'ai testé plusieurs protocole d'extraction d'ARN (kit RNeasy, Chang et Al 1993, Reid et Al 2006) mais je n'obtiens pas un grand rendement (200ng/uL et en faisant 8 répliquat par échantillons j'obtiens au mieux 10ug...) Il m'en faudrais bien plus car après je dois synthétiser des cDNA et là il me faut 100 ng minimum d'ARNm. (10ug d'ARNt--> on perd 100 fois en ARNm--> 100ng ARNm en tout dans le tube)
    Quelqu'un peut il m'aider?
    Merci,

    -----


  2. #2
    MaliciaR

    Re : Extraction ARN

    Salut et bienvenu,

    Sans préciser à partir de quoi, personne ne pourra grand-chose pour toi...
    An expert is one who knows more and more about less and less.

  3. #3
    pyroseq

    Re : Extraction ARN

    Dslée j'oubliais détail important!! A partir de feuille, tige et racine d'arbre d'espèces tropicale!!

  4. #4
    pyroseq

    Re : Extraction ARN

    Au début du protocole de chang et Al, on doit incuber 10-15 min à 65°C, peut etre faut -il incuber plus longtemps, 30-45min ? (je reste sur ce protocole car kit presque épuisé, et protocole de la vigne= Reid et Al =contamination ADN avec un traitement à la DNAse...)
    Sinon, j'ai de bons rapport de DO 260/280 ~2 et 260/230 aussi. Le seul soucis c'est que pour 2g de tissu je n'ai que 10ug d'ARN...

Sur le même thème :

Discussions similaires

  1. Extraction ARN totaux
    Par petitenovice dans le forum Biologie
    Réponses: 7
    Dernier message: 15/10/2008, 16h24
  2. [Biologie Moléculaire] Extraction ARN
    Par soileil dans le forum Biologie
    Réponses: 5
    Dernier message: 15/04/2008, 17h04
  3. [Biologie Moléculaire] Extraction ARN ethanol 70%
    Par K.U. dans le forum Biologie
    Réponses: 5
    Dernier message: 15/03/2008, 20h15
  4. [Biologie Moléculaire] extraction ARN
    Par wishangel dans le forum Biologie
    Réponses: 8
    Dernier message: 15/01/2008, 19h46
  5. [Biologie Moléculaire] extraction ARN
    Par marie49 dans le forum Biologie
    Réponses: 1
    Dernier message: 07/01/2008, 18h20