Comment rechercher une intéraction protéine/glycoprotéine ?

[invite9c8780d9]

Bonjour,

Je cherche des techniques pour trouver une (des) interaction entre une protéine connue et une (des) protéine ou glycoprotéine du tube pollinique (à sa surface ou sécrétée).

Merci de m'éclairer.
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[invitea0443c8c]

Salut!
Ben je pense que tu peux utiliser le double hybride voir même le triple hybride!
Sinon peut-être que tu epux aussi utiliser la coprécipitation.....mai je ne connais pas trop cette dernière technique!
A+
Vinc

[invite9c8780d9]

Merci pour la coprécipitation je n'y avait pas pensé. Je vais regarder ce que ça donne.

[gorben]

tu as aussi la resonnance plasmonique de surface (BIAcore). Tu peux meme recuperer ce qui est fixé sur ta prot et le passer en MS...

[A voir en vidéo sur Futura]

[invite9c8780d9]

je ne connaissais pas cette technique merci

[invite2797fe1c]

Bonjour,

Je me permets de venir pour poser une petite question...par curiosité

comment fonctionne le Biacore ?

Merci
CS

[gorben]

Alors... c'est très physique comme systeme, tu devrais je pense trouver bcp plus d'info en posant ta question sur le forum physique de FS.

Sinon, globalement, tu as un sensor chip qui est composé d'une fine feuille d'or sur laquelle est posé un film de dextran. Le tout venant s'emboiter sous un prisme.
Un rayon lumineux va passer a travers le prisme pour frapper ton sensor chip et se reflechir dessus (+ d'autres chose mais c'est chaud a expliquer). De l'autre coté du prisme, un capteur va enregistrer l'angle de reflexion du rayon lumineux.
Ton dextran peut contenir plusieurs systemes de couplage (par exemple streptavidine, Anti tag his...). Tu couples à ton dextran ta proteine avec un tag his a une extremité (par exemple) et tu fais passer par dessus un des ligands supposés.
Lorsque un de tes ligands va se fixer sur ta prot, il va induire une deviation du rayon lumineux qui sera enregistrée par le capteur derriere le prisme... L'angle de deviation est proportionel à la quatité de ligand fixé.

Voila voila en (très) gros le principe du biacore... mais si tu veux des infos plus completes et plus juste que ca, les physiciens sont plus aptent a repondre