nombres de moles de plasmides recombinants
je dois calculer le nombre de moles de plasmides recombinants dans le volume de mélange de ligation
sachant que :
V mélange de ligation = 33µL
m plasmide dans le mélange de ligation = 783,75ng
je ne vois pas du tout comment faire
alors si quelqu'un a une piste...
et j'ai oublier
le plasmide fait 2686 paires de bases
Si mes souvenirs sont bons, on considère que la masse molaire d'une paire de bases est environ égale à 660 Da (660 g/mol). Il n'y a donc plus qu'à multiplier le nombre de bases de ton plasmide par la masse molaire d'une paire de bases. Le résultat est la masse molaire du plasmide. C'est le maillon qu'il te manquait pour effecteur le calcul final, avec une formule hyper connue.
Greg
à mon avis le prof veut la masse molaire très précise car on sait que le plasmide est du pUC 18
Je pense que LXR vous a donné la bonne réponse.
Sauf à aller compter l'ensemble de chacune des bases du pUC18 vous n'avez aucun moyen d'en connaitre la composition précise. Par ailleurs, pour les applications de la biologie, l'approximation Mb=330 g/mol est parfaitement satisfaisante.
Cordialement,
piwi
Je sers la science et c'est ma joie.... Il parait.
Je viens de confirmer, une paire de bases est exactement considérée comme faisant 660 Da. C'est largement reconnu et donne un résultat suffisamment précis : http://gc.nci.nih.gov/Sequence%20ana...Eppendorf.html.
Un copier-coller de la page internet en lien : 1 µg of pUC18/19 DNA (2,686 bp) = 0.57 pmol.
Cela devrait te permettre de retrouver précisément la masse molaire du plasmide pUC18...
Greg
merci à vous
mais j'ai une autre question
comment faire pour passer d'une masse de plasmide en un nombre de plasmides
Le nombre d'Avogadro, connais-tu? De là, connais-tu la relation Nombre de molécules = Nombre de moles x Nombre d'Avogadro ?
Il faudrait que tu penses sérieusement à revoir les bases, ce genre de relation s'apprend au collège je crois...
Greg
oui je vois bien de quoi tu me parle
merci et je me faite toute petite
Pas de soucis alors, n'hésites pas à revenir poser tes questions si tu ne comprends pas.
Greg
