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nombres de moles de plasmides recombinants



  1. #1
    nelon

    Post nombres de moles de plasmides recombinants


    ------

    je dois calculer le nombre de moles de plasmides recombinants dans le volume de mélange de ligation
    sachant que :
    V mélange de ligation = 33µL
    m plasmide dans le mélange de ligation = 783,75ng

    je ne vois pas du tout comment faire
    alors si quelqu'un a une piste...

    -----

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  3. #2
    nelon

    Re : nombres de moles de plasmides recombinants

    et j'ai oublier
    le plasmide fait 2686 paires de bases

  4. #3
    LXR

    Re : nombres de moles de plasmides recombinants

    Si mes souvenirs sont bons, on considère que la masse molaire d'une paire de bases est environ égale à 660 Da (660 g/mol). Il n'y a donc plus qu'à multiplier le nombre de bases de ton plasmide par la masse molaire d'une paire de bases. Le résultat est la masse molaire du plasmide. C'est le maillon qu'il te manquait pour effecteur le calcul final, avec une formule hyper connue.

    Greg

  5. #4
    nelon

    Re : nombres de moles de plasmides recombinants

    à mon avis le prof veut la masse molaire très précise car on sait que le plasmide est du pUC 18

  6. A voir en vidéo sur Futura
  7. #5
    piwi

    Re : nombres de moles de plasmides recombinants

    Je pense que LXR vous a donné la bonne réponse.
    Sauf à aller compter l'ensemble de chacune des bases du pUC18 vous n'avez aucun moyen d'en connaitre la composition précise. Par ailleurs, pour les applications de la biologie, l'approximation Mb=330 g/mol est parfaitement satisfaisante.

    Cordialement,
    piwi
    Je sers la science et c'est ma joie.... Il parait.

  8. #6
    LXR

    Re : nombres de moles de plasmides recombinants

    Je viens de confirmer, une paire de bases est exactement considérée comme faisant 660 Da. C'est largement reconnu et donne un résultat suffisamment précis : http://gc.nci.nih.gov/Sequence%20ana...Eppendorf.html.

    Un copier-coller de la page internet en lien : 1 µg of pUC18/19 DNA (2,686 bp) = 0.57 pmol.

    Cela devrait te permettre de retrouver précisément la masse molaire du plasmide pUC18...

    Greg

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  10. #7
    nelon

    Re : nombres de moles de plasmides recombinants

    merci à vous

    mais j'ai une autre question
    comment faire pour passer d'une masse de plasmide en un nombre de plasmides

  11. #8
    LXR

    Re : nombres de moles de plasmides recombinants

    Le nombre d'Avogadro, connais-tu? De là, connais-tu la relation Nombre de molécules = Nombre de moles x Nombre d'Avogadro ?

    Il faudrait que tu penses sérieusement à revoir les bases, ce genre de relation s'apprend au collège je crois...

    Greg

  12. #9
    nelon

    Re : nombres de moles de plasmides recombinants

    oui je vois bien de quoi tu me parle

    merci et je me faite toute petite

  13. #10
    LXR

    Re : nombres de moles de plasmides recombinants

    Pas de soucis alors, n'hésites pas à revenir poser tes questions si tu ne comprends pas.

    Greg

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