[Biotechnologie] hétéroduplexes et électrophorèse
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hétéroduplexes et électrophorèse



  1. #1
    invite71ea5d46

    hétéroduplexes et électrophorèse


    ------

    Bonsoir !

    Je ne parviens pas à comprendre pourquoi lors d'une PCR, s'il se forme des hétéroduplexes, cela conduit à la formation de 4 ''barres'' sur le gel d'électrophorèse ? J'aurai pensé plutôt 3 :
    1 au niveau du 1er homoduplexe dont il dérive,
    1 au niveau du 2nd homoduplexe dont il dérive,
    et 1 qui migre moins correspondant au fragments hétéroduplexe.
    Pourquoi observe-t-on 4 "barres" ?
    Je crois que je confonds certaines choses. :S

    Merci d'avance !

    -----

  2. #2
    invite71ea5d46

    Re : hétéroduplexes et électrophorèse

    PS : Si ça peut aider,
    Il me semble que ça avait un rapport avec le nombre de purines ou de pyrimidines sur le brin de 50b. (L'autre fait 47b dans mon exemple)
    Mais je ne me souviens plus exactement. Une purine est plus volumineuse qu'une pyrimidine donc ça expliquerai les 2 barres s'il y a 2 hétéroduplexes. Mais je n'arrive pas à imaginer 2 hétéroduplexes différents : un mésappariement reste un mésappariement, non ?
    :S

  3. #3
    invite71ea5d46

    Re : hétéroduplexes et électrophorèse

    C'est bon, j'ai trouvé !! La nuit porte conseil !
    Il y aura 2 brins de 50b (brin a et brin b) et 2 brins de 47b
    Concernant les hétérodimères :chaque brin de 47b peut se lier soit avecle brin a (qui contient plus de purines) soit avec le brin b (complémentaire au brin a donc qui contient plus de pyrimidines).
    Je me suis répondu à moi même mais si ça peut en aider certains qui se poseraient la question...

  4. #4
    invite71ea5d46

    Re : hétéroduplexes et électrophorèse

    En revanche j'ai une autre question : un individu hétérozygote pour un polymorphisme donné conduit forcément à 4 "barres" lors d'une électrophorèse de la séquence concernée ? non ???!
    Parce que j'ai un exo corrigé qui me pose probleme:
    Voici le schéma de la plaque d'électrophorèse de 4 individus non apparentés.
    ====Ind1 Ind2 Ind3 Ind4
    ====___ ___
    ====___ ___

    50 pb ___ ___ === ___
    47 pb ___ ___ ___

    J'ai noté en cours que :
    l'individu 3 était forcement homozygote m47//m47 (m=mutation) donc qu'il était forcement atteint.
    les individus 1 et 2 sont :
    * soit N//m47 s'il sont porteurs sains (N = normal)
    * soit X//m47 s'il sont atteins (X=autre mutation non détectable ici)
    et concernant l'individu 4 (et c'est LUI qui me perturbe) :
    "il n’est pas porteur de m47, il est donc :
    *soit N//N ou N//X si il est sain,
    *soit X//X’, si il est atteint.
    ==> moi j'aurai dit qu'il est forcement sain.... non ?
    Pourtant je suis sure de mes notes c'est ce qui réapparait sur la diapo du prof d'ailleurs, c'est donc que je n'ai pas compris mais je ne vois pas où?!

    Merci d'avance !

  5. A voir en vidéo sur Futura

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