[Biologie Moléculaire] Mélange PCR
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Mélange PCR



  1. #1
    invite1aa9e8b0

    Mélange PCR


    ------

    Encore une fois, si quelqu'un pouvait vérifier s'il trouve la même chose que moi se serait super! Merci à tt le monde!
    voila l'énoncé:

    Pour réaliser une PCR, on dispose d'eau stérile, et des solutions suivantes:
    - ADN génomique à 1 µg/µ litre
    oligo 1 à 10 pmol/µ litre
    oligo 2 à 10pmol/µ litre
    dNTP à5mM
    tampon 10X
    MgCl2 25mM
    Taq Polymérase 1U/µl
    Le mélange réactionnel de 50 1-11 doit contenir les éléments ci-dessus aux concentrations ou en
    quantités suivantes:
    ADN génomique: 50 ng
    oligo 1: 20 pmol
    oligo 2: 20 pmol
    dNTP: 0,1 mM
    tampon: 1X
    MgCl2: 2,5mM
    " Taq Polymérase: 2U
    Déterminer les volumes de chaque composant, et le volume d'eau dans le mélange
    réactionnel.




    Ce que j'obtiens:

    ADNg=0,05µl
    oligo 1 =2µ
    oligo2 =2µl
    dNTP=1µl
    Tampon=5µl
    MgCl2=5µl
    Taq=2µl


    et donc 32,95µ d'eau distillé


    Merci d'avance!!!

    -----

  2. #2
    Flyingbike
    Modérateur*

    Re : Mélange PCR

    ca me parait bien, mais sache que 0,05µL ce n'est pas pipetable... Envisage de faire une premiere dilution auparavant.

  3. #3
    invite1aa9e8b0

    Re : Mélange PCR

    Ok, merci bcp pour la réponse et le conseil!

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