Bonjour bonjour,
A la suite d'un laboratoire de biologie, nous avons reçu les résultats d'une expérience à laquelle nous n'avions pas participé. Il s'agissait de la mesure des différence d'absoption de nucléotides (dATP et dCTP) ainsi que d'ADN à différents pH (4.9 et 7.8).
Les résultats sont donnés en attachés.
On sait qu'un ratio 260/280 pour l'ADN devrait se situer aux alentours de 1.8-2 et exprime une possible contamination par des protéines.
que pour le dATP, ce ration est sensé être aux alentours de 4.5
et que pour le dCTP, il devrait être aux alentours de 1.5.
Nous savons également que le pH à 7.8 casse les ponts H et qu'un pH de 4.9 casse les liaisons phosphodiester, et que l'absorption de ssDNA est plus grand que celui de dsDNA à cause de l'hyperchromicité.
Questions:
En quoi la modification du pH va agir sur l'absorption des différents nucléotides/DNA ?
Quel est la raison d'un ratio plus élevé que le ratio sans contamination (p.ex pour le dATP qui passe de 4.5 (attendu) à 6.4 (à pH 7.8) ?
Quid du ratio 260/230 ?
Bien à vous et merci d'avance...
David
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