Bonsoir à tous,
Je souhaiterai stresser (stress qui induirait l'apoptose) des cellules HEK 293, cependant je sais qu'elles sont très résistantes aux stress...notamment à l'anisomycine...
Est-ce que quelqu'un aurait déjà essayé de les stresser et pourrait m'indiquer la meilleure "sauce" à utiliser et à quelle concentration.
Merci d'avance
Et un stress oxydatif, genre H2O2?
Bonsoir fabien.che
Merci pour votre retour, cependant pensez-vous que ce genre de stress puisse entrainer l'activation des caspases? Car je souhaite induire un clivage "caspase-dépendant" de ma protéine.
merci
Je ne peux rien certifier mais pour moi, oui.
Attention, les ROS activent aussi la sénescence. Pour être sûr d'induire l'apoptose, le mieux est d'utiliser un ligand de récepteur de mort tel Fas ou TNF. Tu peux aussi induire l'apoptose caspase-dépendante avec des agents antitumoraux comme la doxorubicine, le docétaxel, paclitaxel, la cisplatine. Les UV peuvent aussi induire une apoptose caspase-dépendante mais il faut trouver le bon dosage car là encore, pas assez d'UV peut faire entrer les cellules en sénescence. Enfin, une voie de mort cellulaire qui passe par les caspases est la voie du céramide. Il faudrait que je rafraichisse mes connaissances sur cette dernière car je ne suis pas sûr qu'un traitement de cellules avec du céramide induise l'apoptose ou si c'est uniquement la génération de céramide intracellulaire qui est capable d'activer l'apoptose. En tout cas je t'ai révélé la piste, à toi de chercher si cela t'intéresse.
Merci pour ces informations, j'ai déjà testé différents traitements dont le TNF pour lequel je dois traiter plus de 24h et à de très fortes concentrations pour entrainer un stress suffisant... concernant la doxorubicine, le docétaxel, paclitaxel, la cisplatine, je n'ai jamais testé ces stress merci pour l'info, ces cellules sont vraiment difficiles
je ne sais pas comment ça marche mais par ici on utilise souvent la Staurosporine pour induire l'apoptose
Par activation de la caspase 3 entre autres...Envoyé par Flyingbike
J'utilise aussi la staurosporine pour l'apoptose.
Les UV c'est pas mal, mais c'est du tout ou rien. On a vite fait de griller ses cellules et sur le plan pharmaco, c'est pas évident de renverser l'effet ensuite.
Le maître montre la lune
L' idiot regarde le doigt
J'ai déjà testé la staurosporine et les HEK restent insensibles...pour l'anisomycine et le TNF également... Elles sont très résistantes à beaucoup de stress.
Je vais prochainement utiliser la doxorubicine et voir si cela peut entrainer la mort...par contre est-ce que quelqu'un aurait une idée de la concentration à utiliser?
Merci encore à tous pour vos réponses
