Mutations sur le même allèle ou non

[invite13effbc5]

Bonjour,

J'ai un petit soucis en génétique : je suis actuellement en stage dans un labo et je travaille sur un gène qui présente des mutations dans des microsatellites (2 mutations, chacune dans un microsatellite différent).
Mon encadrante m'a demandé de cloner l'ADNc du gène dans un vecteur pour ensuite le génotyper et le séquencer pour voir si les 2 mutations sont sur le même allèle ou non (ce qui est le plus probable). Le pb c'est que je ne comprends pas vraiment comment à partir du séquençage on pourra voir si les mutations sont sur le même allèle ou non... c'est sûrement une question bête mais je suis un peu perdue, je début seulement mon stage...

J'espère que vous pourrez m'aider ^^
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[invite3651a11a]

Bonjour,


Bonjour,

Tu parles d'allèles différents. Cela signifie donc qu'il va falloir que tu compares les séquences de ces allèles différents. Si tu n'as pour l'instant aucune séquence, il faut alors que tu analyses les séquences de plusieurs clones. Plusieurs représentant ici le nombre suffisant pour couvrir l'ensemble des allèles existants.

[invite13effbc5]

Oki donc si je comprends bien je vais devoir séquencer un certain nombre de colonies pour ensuite comparer la séquence obtenue avec celle de l'allèle sauvage non-muté? et voir si sur la même séquence je retourve les 2 mutations ou si à chaque fois je n'en observe qu'une, ce qui signifierait que mes mutations sont sur des allèles différents... je m'égare pas?