mon milieu vire au rose très rapidement!

[invited07ac121]

Bonjour à tous,

Pour cultiver mes cellules, j'utilise un milieu DMEM coloré au rouge de phénol.
Mon problème, c'est qu'en quelques heures, il est déjà plus rose que rouge!
J'ai un petit soucis avec mon incubateur, qui est en permanence à 6% de CO2 alors que je lui ai rentré une consigne de 5%, mais je doute que cela vienne de là, dans la mesure où il me semble que certaines cultures se font à 10% de CO2...
Avez-vous une idée de ce qui pourrait se passer?
Je suis en pleine amplification, donc changer mes milieux tous les jours, dans un nombre important de flasks, ça ne m'amuse pas!
Et puis ça m'agace de ne pas comprendre ce qui se passe!!!

Pouvez-vous m'aider?
Merci d'avance!
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[LXR]

Bonjour et bienvenue sur Futura Sciences,

C'est très courant que le DMEM devienne rose à légèrement violet. Il ne reste pas très longtemps rouge en tous cas. Une explication qui revient souvent en laboratoire est que la glutamine du milieu de culture se dégrade en ammoniaque au cours du temps. Cela entraine l'alcalinisation du milieu. Pour ma part, je n'y prête pas trop attention et cela n'a pas d'influence sur mes manips. Je pense que c'est un constat général sinon beaucoup de labos se plaindrait de ce milieu qui vire très rapidement au niveau de la couleur.

[invited07ac121]

Merci pour cette réponse!
C'est vrai que j'ai l'habitude que mon milieu reste rouge plus longtemps, mais jusque là, j'utilisais du DMEM sans glutamine, et je rajoutais de la L-Glu lors de la fabrication de mon milieu.
Pour ces manips, j'utilise un DMEM qui contient du Glutamax.
ça vient peut-être de là...
(Mais il me semblait que le Glutamax était plus stable que la glutamine...)
Quoi qu'il en soit, merci pour cette piste, et pour ce message de bienvenue!