Combient de different types de cellules dans le cerveau d´un mamifère

[invite1f0474b9]

Je travail sur un animal transgénique dans lequel j´essaye d´exprimer une protéine dnas les cellules gliales (surtout dans les astrocytes).

Le problème, c´est que chez certains progèniteurs, lorsque j´effectue un immunomarquage de la protéine d´interêt, celle-ci est présente dans des sous -types de cellules que je n´arrive pas à identifier.

Il existe des kits qui permettent de déterminer un nombre limités de sous-types cellulaires (neurone, cellules gliales...) mais ces kit ne m´ont pas aidé à localiser la protéine.

Est-ce que quelqu´un à une idée du nombre de sous-type de cellules présente dans le cerveau d´une souris?
-----

[invite1f0474b9]

Si personne n´a d´idée je change un peu la question.
N´étant pas capable d´identifier le sous-type cellulaire exprimant la protéine d´interêt, est ce que quelqu´un connait une autre méthode que l´histochimie afin de trouver la réponse?

Je me demandais s´il est possible, par microscopie électronique, de marquer ma protéine et ensuite essayer de reconnaitre les différents type de cellules gliales, neuronales...

[Flyingbike]

sinon, la single cell pcr. C'est pas facile, mais tu peux caractériser tes cellules exprimant ta protéine par PCR.

[invite1f0474b9]

Intéressant. Mais je ne connais pas cette méthode. Tu as lien pour ca?

De plus je me demande comment on peut isoler une cellule (voire même un nombre restreint de cellule) d un tissus déjà bloque dans la paraffine.

De plus, je pense que seule certaine cellule exprime le transgene à cause du promoteur inséré. Dans ce cas ne serait il pas plus judicieux d' essayer d' amplifier uniquement l' ARN (PCR avec un seul primer?)

[A voir en vidéo sur Futura]