Fonction de la protéine A-Sepharose ?

[invite1b5d2d81]

Bonjour.
Je travaille sur la protéine p53, à partir d'un article.
Et l'expérience de mon article est la suivante.
De l'ADN extrait de cellules humaines en culture ( cellules Hela ) a été purifié puis digéré par une enzyme de restriction (digestion totale),; aprés la digestion, les fragments sont marqués en 5' ; une partie de la préparation est conservée à 4°C, l'autre partie est incubée successivement en présence de protéine p53, d'anticorps anti-p53, puis de protéine A-Sepharose ; aprés toutes ces incubations, centrifugation, puis extraction de l'adn du culot, les deux essai (partie 1 et 2 ) sont analysés par électrophorése et autoradio.
A quoi sert l'A-Sepharose dans ce protocole ???
Merci !
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[fabien.che]

Dans un vieux tiroir de ma mémoire, quelque chose me dit que la protéine A se "colle" au fragment Fc des anticorps. La sépharose servant à culoter ce que la protéine A a "collé".

[ananda]

Dans un vieux tiroir de ma mémoire, quelque chose me dit que la protéine A se "colle" au fragment Fc des anticorps. La sépharose servant à culoter ce que la protéine A a "collé".

Tout juste, un schéma ici .

D'autre part, on peut aussi utiliser la protéine G à la place de la protéine A, tout dépend de l'isotype de l'anticorps.

[invite1b5d2d81]

Merci beaucoup pour cette information.
Je vais pouvoir continuer mon travail.
Bonne journée.

[A voir en vidéo sur Futura]

[invite1b5d2d81]

Juste une petite question, l'expérience que j'ai décrit, c'est un ChiP ?

[fabien.che]

Pour moi, ça ressemble plus à une espèce de co-IP. Ils regardent quoi derrière dans l'article ?