Déterminer la colocalisation (IF)

[invite84ba569f]

Bonjour,

J'ai fais un double marquage immunofluorescent mais en traitant mes images j'ai du mal à trancher quant à la colocalisation. En fait, quand j'attribue les couleurs vert pour fitc et rouge pour cy5, je trouve que ce n'est plutôt pas co-localisé mais lorsque j'inverse les couleurs c'est colocalisé (couleur orange). Du coup je ne sais plus quoi en penser, comment je pourrais trancher?

Merci,
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[inviteae6c05c4]

Bonjour,

Je n'ai pas compris "inverser" les couleurs, vous voulez dire, les superposer ? (merge ?). C'est une acquisition en microscopie confocale ?

[invite84ba569f]

Bonjour,

Oui c'est de la microscopie confocale. Comme j'utilise des fausses couleurs, selon si j'attribue la couleur verte au fitc et rouge au cy5 ou l'inverse rouge au fitc vert au cy5, je perçois une co-localisation ou pas

[invite84d98912]

Peut on avoir quelques clichés?

[A voir en vidéo sur Futura]

[Flyingbike]

tu cherches a déterminer la colocalisation à quelle échelle ?

[invite84ba569f]

pour la colocolisation entre une protéine et les mitochondries, pour savoir si ma protéine à une localisation mitochondriale

[invitea74316c7]

Sauf erreur des programmes comme Imaris permettent d'effectuer ce genre d'opération!