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Extraction adn phénol/chloroforme




  1. #1
    eije

    Extraction adn phénol/chloroforme

    j'aurais besoin de connaitre le role du phénol, du chloroforme et de l'éthanol lors d'une extraction d'ADN. car j'ai l'impression qu'ils font tous la même chose : débarassé l'adn des débris lipidiques et des protéines.

    voila si vous avez des infos plus complètes je vous en serait reconnaissante. MERCI.

    -----


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  3. #2
    gorben

    Re : extraction adn phénol/chloroforme

    salut!
    le phenol debarrasse des proteines, le chloropphorme des lipides et l'ethanol permet de precipiter l'ADN (en presence de sels et a froid)
    A+

  4. #3
    eije

    Re : extraction adn phénol/chloroforme

    Super! Merci!


  5. #4
    sawsaw

    Re : extraction adn phénol/chloroforme

    a quoi servent le Xgal, le bromure d'ethidium, le phénol, le chloroforme,l'acétate de sodium et l'éthanol dans le clonage moléculaire
    merci d'avance

  6. #5
    Yoyo

    Re : extraction adn phénol/chloroforme

    Bonsoir,

    Merci de lire mon MP. Sinon pour le phenol et chloroforme il serait agreable qu'au moins tu lises les réponses deja données dans ce meme fil! (tu as du le lire avant de poster ta question non?).
    Sinon pour qu'on puisse te répondre il faudrait aussi donner ton niveau et pourquoi tu cherches ces infos.

    Yoyo

  7. A voir en vidéo sur Futura
  8. #6
    piwi

    Re : extraction adn phénol/chloroforme

    Citation Envoyé par sawsaw
    a quoi servent le Xgal, le bromure d'ethidium, le phénol, le chloroforme,l'acétate de sodium et l'éthanol dans le clonage moléculaire
    Ce genre de poste fait typiquement penser à quelqu'un qui n'a même pris soin de se renseigner par lui même...
    C'est la liste des courses là!

  9. #7
    aloux

    Re : extraction adn phénol/chloroforme

    Bonjour à tous.J'ai récemment fais un tp de biochimie (L2 SV),consistant a extraire l'adn a partir de cellules de foie de porc.Nous avons également utilisé de l'alcool a froid ,du chloroforme et de l'isoamylalcool(qui favorise apparement la séparation des phases et la fomation de mousses).Cependant,nous n'avons pas utilisé de phenol mais du NaClO4.Je n'arrive pas a trouver quel est son role,est ce que ça peut agir comme le phenol?
    Voila merci .

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  11. #8
    lullane

    Re : extraction adn phénol/chloroforme

    Il me semble que les ions Na+ vont avoir pour rôle de pieger les ions phosphates de l'ADN, c qui va permettre une meileure agrégation de la molécule... En plus ce la se fait mieux si c'est un sel or c'est le cas.

  12. #9
    Keopsuss

    Re : extraction adn phénol/chloroforme

    Bonjour, je souhaiterai poser une question sur le mode de conservation du tissu biologique avant extraction de l'ADN.
    Je travailles sur des gonades de crustacés d'eau douce et afin de mettre en évidence la présence de microparasite, je dois extraire l'ADN et faire une PCR-RFLP.

    Or depuis quelque temps, je n'arrive plus extraire d'ADN, que ce soit avec un kit ou la méthode phénol/chloroforme.
    Est ce que le problème pourrait venir du fait que je stocke mes tissus dans de l'éthanol absolu un certain temps (ça se compte en semaine)?

    En espérant être un peu plus éclairé sur la question, je tenterai une extraction sur des gonades d'individus stocké à -80°C.

    Je vous remercie.

  13. #10
    Mastard

    Re : Extraction adn phénol/chloroforme

    Bonsoir,
    Désolé de t'apporter une réponse si tardive, mais je m'y attelle maintenant et je souhaite que cela puisse te servir à l'avenir.
    Ma réponse sera brève : OUI ! Tu as ruiné tes échantillons.

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