Bonjour,

Je suis en train de mettre au point une pcr multiplex sur un gros gène. J'ai 8 mix contenant 4 exons. J'ai fait des gammes de mgcl2, j'en ai actuellement 5 sur 8 au point (à voir si ils remarcheront après).
Je rencontre plusieurs petits soucis:
-j'ai certaines bandes qui sortent légèrement en dessous des tailles attendus (surtout pour des fragments de plus de kb), et ca m'inquiete??
- des amorces qui ont marché une premiere fois en simplex, lorsque je les repasse en simplex (pour pouvoir les séquencer et vérifier leur taille) ne marchent plus ds les conditions de départ???
-j'ai un mix qui malgré les différentes gammes de mgclé je me retrouve avec trop de bandes???

Si vous auriez des explications ou des idées pour résoudre ses soucis, ca serait cool.

Merci d'avance.