congelation décongélation ADN

[invite1766bbce]

Bonjour membres du forum

C'est la première fois que j'utilise ce forum que je trouve trés interessant.
J'espere que je serai utile de part ma specialité de microbiologie. Je voudrais que l'on me rassure et ou du moins on m'informe; si la congélation décongélation de _20°C et _4°C de l'ADN stock work (diluée à la concentration de travail) est néfaste et altere l'ADN.
J'aimerai avoir l'information SVP; car j'ai utilise le meme stock pour la PCR; depuis un moment je n'arrive pas à avoir de l'amlipfication alors que ça a marcher au début?
Je vous remercie d'avance.
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[invite853321bf]

C'est la répétition de ces cycles de congélation décongélation qui est néfaste. Lors de la congélation, il y a formation de cristaux qui peuvent endommager l'ADN. Plus tu crées de cristaux dans ton tube, plus tu as de risques d'endommager gravement ton ADN.

[invite28f6e6c6]

En général, pour de l'ADN génomique, on ne fait pas de congelation. L'ADN est stable à 4°C. Si on congele, on casse les grosses molécules d'ADN.

Pour les plasmides c'est possible mais pas de congelation/décongelation cyclique.

[Flyingbike]

les adn génomiques et plasmides bien préparés se gardent des années a 4°, on peut donc éviter de les congeler a chaque fois en effet.

[A voir en vidéo sur Futura]

[invite1766bbce]

Merci beaucoup,

Remettre l'ADN aprés chaque utilisation à _20°C n'est pas une bonne idée. Je pensais bien faire. Merci beaucoup.