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Perte de la transformation d'une cellule cancéreuse.



  1. #1
    Magelis

    Perte de la transformation d'une cellule cancéreuse.

    Bonjour,

    Je viens de décongeler une lignée de cellules cancéreuse censée sur-exprimer une protéine donnée. Or, après qPCR, la protéine est normalement exprimée. Il y a un an, cette lignée sur-exprimait bien la protéine mais plus maintenant. J'ai re-testé mon couple d’amorces, ainsi que d'autres paramètres.
    Au final, mes cellules ont bien perdu la sur-expression de la dite protéine.

    Quelqu'un sait quels phénomènes peuvent amener une cellule à "recracher" un gène, quels phénomènes peuvent faire que ces cellules soient OK sauf au niveau du transgène? (sachant que mes cellules sont bonnes puisqu'il y a un an elles marchaient nikel).

    Merci

    -----


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  3. #2
    YouLab

    Re : Perte de la transformation d'une cellule cancéreuse.

    Si elle exprime encore elle n'a pas perdu le gène.

    Je verrai plutôt du côté de sa viabilité, quelles étaient les conditions de conservation?

  4. #3
    Magelis

    Re : Perte de la transformation d'une cellule cancéreuse.

    Bonjour, -180°C, azote liquide. Bonne journée

  5. #4
    YouLab

    Re : Perte de la transformation d'une cellule cancéreuse.

    Et c'était une lignée fraîche ou qui a déjà été congelée décongelée plusieurs fois?

  6. #5
    Magelis

    Re : Perte de la transformation d'une cellule cancéreuse.

    Techniquement, la lignée a été congelée et décongelée peu de fois (2 à 3 fois maxi). Niveau repiquage j'étais à P6 (6 passages). On ne peut pas parler de lignée "fraîche". Pourquoi le fait de décongeler ou repiquer aurait pu faire perdre l'expression de ma molécule à mes lignées?
    Cordialement.

  7. A voir en vidéo sur Futura
  8. #6
    YouLab

    Re : Perte de la transformation d'une cellule cancéreuse.

    Oui c'est possible que si elle n'est pas très fraîche il y ait un perte de surexpression au profit d'autres protéines "vitales".

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  10. #7
    Magelis

    Re : Perte de la transformation d'une cellule cancéreuse.

    Vous en savez plus sur ce sujet?

  11. #8
    YouLab

    Re : Perte de la transformation d'une cellule cancéreuse.

    Sur de l'eucaryote pas trop, je te conseille de faire de la biblio et de tester des lignées plus fraîches si tu en as.

  12. #9
    Magelis

    Re : Perte de la transformation d'une cellule cancéreuse.

    oki, merci beaucoup pour ton aide

  13. #10
    YouLab

    Re : Perte de la transformation d'une cellule cancéreuse.

    De rien! J'espère que ça pourra t'aider!

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