Dosage de protéine

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Bonjour,

Je voudrais savoir quelle méthode vous me proposez pour réaliser un dosage de protéine dans une dispersions de gomme arabique autre que le dosage de Bradford.

Merci bcp
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[invite71f23525]

Je ne connais pas les caractéristiques de la gomme arabique, en effet, certaines méthodes de dosage sont sensible à certains composants chimiques il faudra donc que tu t'adaptes. En méthode de dosage alternative à celle de Bradford, on a la méthode de lowry (dosage en présence de SDS) ou la méthode micro BCA.

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Tu veux doser une seule protéine ou un cocktail protéique?

[invite22950137]

D'aprés la littérature la gomme arabique contient différentes protéines dans sa structure. La GA contient 39 à 42 % de galactose, 24 à 27 % d’arabinose, 12 à 16 % de rhamnose, 14 à 16 % d’acide glucuronique (qui lui confère son caractère anionique), 1,5 à 2,6 % de protéines, 0,22 à 0,39 d’azote et 12,5 à 16 % d’eau.
Mon dosage de bradford m'a donné une concentration en protéine supérieure aprés centrifugation qu'avant ce qui n'est pas possible. C'est pour cela que je cherche quelle méthode je pourrais utiliser à la place.

[A voir en vidéo sur Futura]

[invitec718404f]

Mon dosage de bradford m'a donné une concentration en protéine supérieure aprés centrifugation qu'avant ce qui n'est pas possible. C'est pour cela que je cherche quelle méthode je pourrais utiliser à la place.

Je renouvelle ma question: est ce que tu veux doser une protéine pure ou un mélange?

[invite22950137]

un mélange

[invitec718404f]

Arf dommage! Je n'ai pas mieux a te proposer alors hélas!

[invite71f23525]

En effet, si c'était une protéine pure dont l'epsilon et la masse molaire était connue, il y avait le dosage par nanodrop.

[invitec718404f]

Moi je fais a la guanidine 6M, elle dénature la protéine, dosage a 280nm et ensuite je vais chercher le epsilon sur Expasy a partir de la sequence de la proteine, et enfin avec Béer Lambert on retombe sur ses pattes!