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témoins de pull down



  1. #1
    tit_biochimiste

    témoins de pull down


    ------

    Bonjour,

    vraiment, ce forum est super! ça fait du bien de voir parler les internautes de choses intéressantes!!
    bref, trêve de compliments!

    j'ai une question qui me chiffonne: lors d'un test d'intéraction entre deux protéines (A-his et B-GST pour être plus claire!) par pull-down sur colonne, je me demande si je n'ai pas oublié des témoins...
    je dois tester si ma protéineA-his ne réagit pas avec ma colonne glutathion. Et quel autre témoin il faudrait faire pour bien faire justement?
    quelqu'un m'a conseillée de faire un témoin en passant sur la colonne ma protéineA-his incubée avec de l'albumine. Qu'est ce que vous en pensez? ça testerait quoi exactement?
    quelqu'un d'autre m'a dit qu'il fallait abusolument toujours tester le témoin : protA-his + GST sur ma colonne. Pourquoi il faut mettre la prot A??
    (Au fait, je regarde les résulats sur un western blot)

    D'avance merci beaucoup de vote réponse! je suis perturbée par ce truc même le week end! vous pensez !! c'est terrifiant!

    -----

  2. Publicité
  3. #2
    tit_biochimiste

    Re : témoins de pull down

    Au secours tout le monde!
    j'ai vraiment besoin d'une réponse!! même si vous êtes pas super calés à ce sujet, essayez, ça peut toujours m'aider!
    Merci

  4. #3
    gorben

    Re : témoins de pull down

    salut

    J'essaierai de passer de la BSA pour m'assurer que ton interraction n'est pas non spécifique et de la GST pour verifier que tes conditions permettent bien une interraction.

    A+

  5. #4
    tit_biochimiste

    Re : témoins de pull down

    Bonjour!
    avant tout, merci de la réponse!!
    donc, on ne teste que la spécificité et la fonctionnalité en fait? rien d'autre?
    archi merci!!

  6. #5
    gorben

    Re : témoins de pull down

    Heu je ne suis pas sur, je n'ai jamais fais de pull down... Je t'ai juste donné les temoins qui me semblent logique. Attend peut etre encore un peu, un specialiste va peut etre encore passer sur le forum

  7. A voir en vidéo sur Futura

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