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Question sur le fonctionnement des amorces en PCR



  1. #1
    lwarlee

    Question sur le fonctionnement des amorces en PCR


    ------

    Bonjour à tous, j'ai besoin d'un cou de pouce! je voudrais me remettre à la page et j'ai une question car je suis vraiment pas sur d'avoir saisie le principe :
    En fait il ce passe quoi sur l'amplification PCR si l'amorce sens 5'->3' est définie sur le brin antisens avec comme "orientation" 3'->5' et l'amorce antisens est sur le brin sens avec pour orientation 3'->5' ? et du cou pareil mais avec l'inverse soit avec des orientations 5'->3'.

    quelqu'un peu m'expliquer?

    -----

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  3. #2
    Biologist

    Re : Question sur le fonctionnement des amorces en PCR

    les amorces vont avoir un double rôle : en s'hybridant à l'ADN matrice, elles délimitent la région d’ADN à amplifier et avec leur extrémité 3' OH libre servir d’amorce pour l’ADN polymérase.

  4. #3
    lwarlee

    Re : Question sur le fonctionnement des amorces en PCR

    Merci d'avoir pris le temps de répondre! Par contre jsui navré mais ca ne répond pas à ma question !
    Ca ne m'aide aucunement

  5. #4
    lwarlee

    Re : Question sur le fonctionnement des amorces en PCR

    vous me redonnez un élément du cour que je n'arrive pas a mettre directement en application d’où ma question!
    merci quand même.

    Quelqu'un peut-il me renseigner svp?

  6. #5
    TanguyE

    Re : Question sur le fonctionnement des amorces en PCR

    Bonjour,

    Normalement tes amorces sont choisies de la façon suivante:

    pcr.jpg

    Si tu fais l'inverse, tu n'auras pas d'amplification vu que tu va "t'éloigner" de ta région cible puisque l'élongation se fait toujours de 5' vers 3'. Imagine toi que les amorces sont "posées" à l'autre bout de chaque brin avec la flèche orientée vers l'extérieur.

  7. A voir en vidéo sur Futura
  8. #6
    kamor

    Re : Question sur le fonctionnement des amorces en PCR

    Le sens de l'amplification ne dépend pas des amorces mais de la DNA polymerase qui ne va que dans un sens. A partir de là, vous devriez pouvoir imaginer ce que cela vous donnerait de faire comme vous l'entendez

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