Bonjour à tous, j'ai besoin d'un cou de pouce! je voudrais me remettre à la page et j'ai une question car je suis vraiment pas sur d'avoir saisie le principe :
En fait il ce passe quoi sur l'amplification PCR si l'amorce sens 5'->3' est définie sur le brin antisens avec comme "orientation" 3'->5' et l'amorce antisens est sur le brin sens avec pour orientation 3'->5' ? et du cou pareil mais avec l'inverse soit avec des orientations 5'->3'.
quelqu'un peu m'expliquer?
les amorces vont avoir un double rôle : en s'hybridant à l'ADN matrice, elles délimitent la région d’ADN à amplifier et avec leur extrémité 3' OH libre servir d’amorce pour l’ADN polymérase.
Merci d'avoir pris le temps de répondre! Par contre jsui navré mais ca ne répond pas à ma question !
Ca ne m'aide aucunement
vous me redonnez un élément du cour que je n'arrive pas a mettre directement en application d’où ma question!
merci quand même.
Quelqu'un peut-il me renseigner svp?
Bonjour,
Normalement tes amorces sont choisies de la façon suivante:
Si tu fais l'inverse, tu n'auras pas d'amplification vu que tu va "t'éloigner" de ta région cible puisque l'élongation se fait toujours de 5' vers 3'. Imagine toi que les amorces sont "posées" à l'autre bout de chaque brin avec la flèche orientée vers l'extérieur.
Le sens de l'amplification ne dépend pas des amorces mais de la DNA polymerase qui ne va que dans un sens. A partir de là, vous devriez pouvoir imaginer ce que cela vous donnerait de faire comme vous l'entendez
