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Technique de PCR en temps réel



  1. #1
    alkiro

    Technique de PCR en temps réel

    Bonjour à tous,

    J'aurais une question sur les résultats expérimentaux suite à une PCR en temps réel.
    Donc voici les résultats obtenus: PCR.jpg

    Pour le graphique de gauche pas de problème pour le comprendre: la PCR crée des copies donc l'ADN et l'ARN augmentent en fonction des cycles.

    En revanche pour le graphe de droite je ne comprends pas, pourquoi plus les cycles augmentent et plus la quantité de molécules diminuent ça devrait être l'inverse logiquement non ?
    Plus les cycles augmentent et plus on a de copies d'ADN et d'ARN et donc plus le nombre de molécules augmente...

    Voilà, merci de m'éclairer sur ce sujet !!

    Merci d'avance et bonne journée.

    -----


  2. #2
    kamor

    Re : Technique de PCR en temps réel

    En attente de la validation de la pièce jointe, la PCR n'augmente jamais la quantité d'ARN, la seule chose qui est répliquée est de l'ADN.
    Dernière modification par kamor ; 12/03/2012 à 11h40.

  3. #3
    Flyingbike

    Re : Technique de PCR en temps réel

    Le cycle number correspond au nombre de cycles nécessaires pour que la quantité d'ADN atteigne un certain seuil. Ce nombre est lié à la quantité initiale d'ADN, puisque moins il y en a, plus il faut de cycles pour franchir la valeur seuil. C'est d'ailleurs ce qui fait que la PCR en temps réel peut être quantitative. Dans le cas idéal, si on représente le "cycle number" en fonction du log de la quantité initiale de matrice, on obtient une droite comme sur le panneau de droite, dont la pente est corrélée a l'efficacité de PCR.

    Donc sur la figure, plus on se déplace a droite, plus on a d'ADN initial, plus le nombre de cycles nécessaires pour faire émerger ton signal est petit...

  4. #4
    alkiro

    Re : Technique de PCR en temps réel

    Ah d'accord ! Un grand merci pour vos réponses qui sont parfaitement claires !

    Merci encore et bonne fin de journée !

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