Bonjour, je suis etudiante en biologie médicale, et je prepare un travail à présenter en classe : test d'hybridation sur bandelette visant a identifier les mycobactéries appartenant au complexe tuberculosis.
Pour amplifier les sequences d'ADN : PCR.
Ma question : a quoi ca sert de biotinyler les amorces???
je ne trouve d'explications nulle part.
je remercie d'avance la ou les personnes qui pourront rapidement m'éclairer.
merci
Sabrina.
Salut à toi,
Bhé tu fais un test d'hybridation, or cette hybridation, il faut bien que tu puisses la visualiser.
Tu marques donc tes amorces avec la biotine, et tu peux les révéler avec un anticorps (marquéantibiotine, ou tu peux les isoler, (passage sur colone avec anticorps antibiotine fixé
Comme ca à la fin de la PCR, tu aurais des copies de la séquence d'intéret directement marquées à la biotine, la classe
Enfin c'est comme ca que je vois la chose ^^
Bonsoir
La biotinilation de tes amorces permets ensuite de reveler tes amplifications en les detectant grace a des anticorps anti-biotine. La biotine peut etre aussi utilisée pour purifier le produit (ou les proteines) sur des colones de streptavidine (la biotine et la streptavidine forment des interactions non covalentes qui ont pourtant une "force" equivalente. Donc ces interactions sont tres fortes ce qui permet de bonnes purifications.)
Yoyo
Héhé Yoyo preum's
Ceci dit tes* explications sont plus completes, mieux formulées, et plus justes ! enfin bref je m'incline.
Je m'en veux pour la streptavidine, je l'ai révisé il y a trois jours, et paf ce soir j'oublie...
Désolé pour ce post-ci qui ne sert à rien du tout, et qui ne fait pas avancé le schmilblick, mais bon bref...J'espère que j'échapperai à la trépanation.
* J'ai pris une mauvaise habitude sur les forums, je tutoie tout le monde, c'est plus convivial, cela ne te dérange pas Yoyo ?
